目錄:華譜(上海)檢測技術(shù)有限公司>>質(zhì)控細胞培養(yǎng)>>電轉(zhuǎn)儀/電穿孔儀>> 電轉(zhuǎn)儀celetrix
| 產(chǎn)地類別 | 進口 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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電轉(zhuǎn)儀celetrix
細胞電轉(zhuǎn)染（電轉(zhuǎn)），也叫細胞電穿孔(electroporation), 是把外源大分子物質(zhì)DNA,、 RNA,、 siRNA、 蛋白質(zhì)以及一些小分子等導入細胞膜內(nèi)部的重要方法,。
在瞬間強大電場的作用下,，溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性，帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜,。 由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,，細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受，細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,，細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,，因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。 電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,，隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處,。
普通電轉(zhuǎn)能量過高可導致部分細胞因膜破壞而死亡，其中能存活下來的細胞內(nèi)部都不會受到電流影響,，因為細胞膜完整是細胞存活的必要條件,。
由千電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法，細胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小,。 相比化學轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,，電轉(zhuǎn)可以用在所有的細 胞種類上，而且容易定量控制,。
以及相關(guān)的電擊管與電轉(zhuǎn)液綜合優(yōu)化了儀器電學特性,、 電擊管內(nèi)的電場均勻度以及電轉(zhuǎn)液的細胞保護作用，是獲得高效,、 低毒性細胞電轉(zhuǎn)的解決方案,。
celetrix電轉(zhuǎn)儀應(yīng)用：
• 有效的細胞：幾乎所有的真核細胞，包括所有細胞系,，原代細胞,，干細胞，血液和免疫類細胞,，神經(jīng)細胞,，植物細胞和胚胎。
• 可以電轉(zhuǎn)的物質(zhì)包括DNA,、 RNA,、 siRNA、 蛋白質(zhì)等,。
• 適用實驗：瞬時或穩(wěn)定表達蛋白質(zhì),、 基因敲除與敲入,、 siRNA和其他分子機制研究。
• 科研領(lǐng)域：細胞分子生物學,、 免疫學,、 血液學、 神經(jīng)學,、 癌癥研究,、 新藥開發(fā)等。
功能強大 操作簡單
效率高 細胞死亡率低
適用所有真核細胞,；可以電轉(zhuǎn)DNA,、RNA、siRNA,、蛋白質(zhì)等,；
外觀美觀、界面簡潔,、操作簡單,。
電脈沖參數(shù)設(shè)定方便，內(nèi)部電路反應(yīng)迅速,，設(shè)定完成即可啟動,，瞬間完成電轉(zhuǎn)。
示波器功能,，顯示實際通過樣品的電流波形,，可視化掌控實驗質(zhì)量。
LED照明燈,，清楚指示電擊管連接狀態(tài),。
功率強大，單次高效電轉(zhuǎn)可達1000ul,，可以經(jīng)濟快速的電轉(zhuǎn)大量細胞。
全部過程只需5步
1,、懸浮細胞（貼壁細胞先消化成單細胞狀態(tài)）1000rpm離心3min,。
2、無血清細胞培養(yǎng)液洗一遍,、1000rpm離心1min,。
3、重懸細胞在電轉(zhuǎn)液中,，加入DNA,，將細胞轉(zhuǎn)移至電擊管蓋好并放入儀器中。
4,、設(shè)定參數(shù)進行電擊,，大部分細胞系可以使用30ms單脈沖,，只需改變一個電壓參數(shù)。
5,、取出細胞進行培養(yǎng),。
技術(shù)參數(shù)
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儀器型號 |
LE款 |
EX款 | |
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體積使用范圍 |
20ul~200ul |
20ul~1000ul | |
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常用細胞量 |
20ul |
0.2×106~2×106 |
0.2×106~2×106 |
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120ul |
1.2×106~1.2×107 |
1.2×106~1.2×107 | |
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200ul |
2×106~2×107 |
2×106~2×107 | |
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600ul |
6×106~6×107 | ||
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1000ul |
1×107~1×108 | ||
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電轉(zhuǎn)脈沖電壓 |
300V-1500V |
300V-1500V | |
celetrix電轉(zhuǎn)儀應(yīng)用的優(yōu)勢：
Celetrix新一代電轉(zhuǎn)可以高效轉(zhuǎn)染從新鮮PBMC到刺激培養(yǎng)階段的T細胞。 與其他電轉(zhuǎn)技術(shù)相比,， Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)具有效率,。
我們的技術(shù)也具有細胞存活率，并且細胞在電轉(zhuǎn)后能夠和未電轉(zhuǎn)細胞
Celetrix電轉(zhuǎn)儀使得CAR-T, TCR-T制備,、 CRISPR介導的基因編輯等變得容易,。
目前70%以上的治療性抗體蛋白都是由CHO細胞產(chǎn)生
的，Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)對CHO細胞可以達到高效穩(wěn)定
(90%以上）的電轉(zhuǎn)效率和80%以上的存活率,， 為治療 性抗體細胞轉(zhuǎn)染領(lǐng)域提供了更加高效,、便捷、 穩(wěn)定的轉(zhuǎn) 染方法,。
利用Celetrix的電轉(zhuǎn)技術(shù)電轉(zhuǎn)Cas9蛋白和gRNA (+)或者Cas9蛋白,，通過T7El核酸內(nèi)切酶檢測基因編輯效率，在APP, AAVSl, OCT4和PDCDl四個基因位點的編輯效率均超過50%, 其中AAVSl基因位點編輯效率能夠達到70%,。
• 電極杯中樣品與電極接觸面積大,，電化學反應(yīng)產(chǎn)生毒性物質(zhì)多，并且產(chǎn)生非常多的氣泡,。 氣泡對電轉(zhuǎn)的實際影響非常大,。
• 由千氣泡是絕緣體，電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過,，這樣導致氣泡間隙的溶液中電流富集升高,，處千其中的細胞因承受太高的電壓而死亡。
電極杯內(nèi)的溶液上方受到液面效應(yīng)影響,，電場不均勻,。 靠近兩個電極1-2mm的區(qū)域由千氣泡的作用，電場也不均勻,。電極杯內(nèi)電場比較均勻的較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域很?。ㄓ覉D藍色部分），而1mm或者
2mm的電極杯甚至可能沒有較優(yōu)電轉(zhuǎn) 區(qū)域,。
液體樣品密封呈規(guī)整圓柱形,，沒有液面效應(yīng)影響電場均勻度。
電極與液體接觸面積小,，氣泡少又而且被壓縮,，不影響電流分配。
電擊管內(nèi)部電場均勻,，全部都是有效電轉(zhuǎn) 區(qū)域,。
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