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農(nóng)殘速測(cè)儀培訓(xùn)
農(nóng)殘速測(cè)儀檢測(cè)原理及操作步驟
【檢測(cè)原理】
有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶的活性具有抑制作用，通過(guò)測(cè)定該酶的活性被抑制的程度即可知樣品中含有農(nóng)藥的殘留情況。
計(jì)算公式：抑制率(%)=(ΔA0-ΔAt)/ ΔA0×100%
【檢測(cè)對(duì)象】
糧食、蔬菜、水果、肉、蛋,、奶、水產(chǎn)品等
【技術(shù)指標(biāo)】
檢測(cè)下限：1% (抑制率)
檢測(cè)范圍：0-100% (抑制率)
【生產(chǎn)日期/保質(zhì)期】
生產(chǎn)日期：見(jiàn)外包裝,；保質(zhì)期：6個(gè)月
【試劑配制】
緩沖液：將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,，溶于500ml純凈水中，溶解,、攪拌混勻即可,。
②試劑A（膽堿酯酶）：往標(biāo)注為膽堿酯酶試劑瓶中加入適量緩沖液配成溶液，搖勻后可直接使用（按照瓶簽上規(guī)定的用量加緩沖液）,。
③試劑B（顯色劑）：往標(biāo)注顯色劑試劑中加入9ml緩沖液,，搖勻即可。
④底物：往標(biāo)注為底物瓶中加入9ml純凈水,，搖勻即可,。
【操作步驟】
1.樣品前處理：
(1) ①植株：稱(chēng)取5g樣品（葉菜剪成寬度為1厘米的菜樣，塊根菜取1厘米左右的表皮樣品）放入三角瓶中,，加入10ml緩沖液后,，振蕩提取2分鐘；
②茶葉：稱(chēng)取0.5g茶葉樣品,，加入5ml丙酮,，振蕩提取5分鐘；取0.2ml上述丙酮溶液,，40~50℃水浴蒸干,；加入2.5ml緩沖液，振蕩2分鐘,；（自備丙酮）
(2) 若浸提液清澈無(wú)色或顏色較淺,，取上清液待測(cè)；
若浸提液混濁,，離心,，取上清液待測(cè)；
若浸提液色素干擾嚴(yán)重,，可用活性炭脫色,，具體方法如下：
將浸提液轉(zhuǎn)移至另一個(gè)三角瓶中，加入0.1~0.5g活性碳(根據(jù)顏色深淺調(diào)整),，水浴70℃加熱5分鐘,，取出趁熱過(guò)濾,，濾液待測(cè)。
[備注]：蔥,、蒜、蘿卜,、韭菜,、芹菜、香菜,、茭白,、蘑菇及番茄汁液中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性,。處理這類(lèi)樣品時(shí),，可采取整株（體）浸提，避免次生物物質(zhì)干擾,。
2.檢測(cè)樣品的制備：
(1) 空白對(duì)照液:
① 取緩沖液2.5ml,，加入1cm比色皿中，再加入試劑B 100ul,，混勻,，靜置15分鐘（37度恒溫更佳）。
②加入試劑C 100ul,；
③搖勻后立即測(cè)試,。
(2) 檢測(cè)樣品液:
①取待測(cè)樣品液2.5ml，加入1cm比色皿中,，再加入試劑B 100ul,，靜置15分鐘（37度恒溫更佳）。
②加入試劑C 100ul,；
③搖勻后立即測(cè)試,。
3、檢測(cè)樣品測(cè)試：
(1) 空白對(duì)照測(cè)量：
① 將比色皿放入的通道中,；
② 按“對(duì)照”鍵,，屏幕下方顯示測(cè)量時(shí)間；
③ 檢測(cè)結(jié)束后,，儀器自動(dòng)顯示通道檢測(cè)空白對(duì)照的測(cè)試結(jié)果△A0,。
[備注]：a 顯色時(shí)間為3min，空白對(duì)照值應(yīng)≥0.3,，當(dāng)空白對(duì)照值在＜0.3時(shí),，需重做空白對(duì)照，若重復(fù)多次的空白對(duì)照值＜0.3時(shí),，必須更換酶試劑,。
(2) 樣品測(cè)量：
① 將比色皿放入的通道中,；
② 按“樣品”鍵，屏幕下方顯示測(cè)量時(shí)間,；
③ 檢測(cè)結(jié)束后,，儀器自動(dòng)顯示通道檢測(cè)樣品的測(cè)試結(jié)果△At。
【判斷標(biāo)準(zhǔn)】
(1) 樣品的抑制率在40~50%之間為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品,；
(2) 抑制率＞50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品,，表明被測(cè)樣品的農(nóng)藥殘留毒性可能超過(guò)安全的界定標(biāo)準(zhǔn)，建議用氣相色譜等儀器分析法作進(jìn)一步確認(rèn),。
【注意事項(xiàng)】
(1)加入底物后,，應(yīng)迅速混勻，立即測(cè)試,。
(2)所用的檢測(cè)液對(duì)皮膚均具有不同程度的傷害,，使用時(shí)請(qǐng)做好防護(hù)。不慎沾到皮膚應(yīng)立即擦干并用大量水沖洗,。
(3)檢測(cè)試劑請(qǐng)務(wù)必在2~4ºC冰箱保存,。