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非洲豬瘟快速診斷試劑盒如何使用
非洲豬瘟快速診斷試劑盒 【競道廠家發(fā)布】 Rapid diagnostic kit for African swine fever 型號：JD-ZWSJ
競道廠家為您提供符合國家要求的非洲豬瘟試劑盒,，一下為操作步驟：
【操作步驟】
一、樣品制備
1,、 血液樣品：抗凝血樣品置離心管中,，8000轉/分鐘離心2分鐘,，取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中，待凝固后,，8000轉/分鐘離心2分鐘,，取上層血清，置于滅菌離心管中,，編號待檢,。
2、 組織樣品：采集脾臟,、肝臟,、淋巴結、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨,，加入1 mL生理鹽水混勻,，8000轉/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心骨中,，編號待檢,。
3、 口腔液：進食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團吸引動物咀嚼,，收集口腔液大于 500uL,， 8000轉/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中,，編號待檢,。
4、 飼料：取適量研磨后的飼料(約0.2g),，放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP 管屮,，振蕩混勻，8000轉/分鐘離心2分鐘,，取上清于滅菌離心管中,編號待檢.
5,、 灰塵：用無菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵，放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP管中,，振蕩混勻,，8000轉/分鐘離心2分鐘，取上清于滅菌離心管中,，編號待檢,。
二,、DNA的提取
1、取裂解液200uL加入無核酸酶1.5 mL離心曾屮,，分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次,，室溫放置5分鐘(如果室內(nèi)溫度較低時.需放置25°C水浴溫育)，再加入200uL無水乙醇,，顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉/分鐘離心1分鐘處理,，取上清液，以避免堵塞柱子;
2,、 將液體轉入套有收集管的吸附柱中,， 12000rpm離心1分鐘：
3、 棄收集管液體,，向吸附柱中加600uL洗液I， 12000 rpm離心1分鐘;
4,、 棄收集管液體,，向吸附柱中加600uL洗液II， 12000 rpm離心I分鐘;
5,、 棄收集管液體,，12000 rpm離心2分鐘，以*去除殘留洗液;
6,、將吸附柱轉入新的無核酸酸1.5mLEP管(長臂型)中,，向柱中央滴加50 uL洗脫液，靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘,，EP管中液體即為病毒DNA,。
