Sciencell平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基1101
品牌:Sciencell
英文名:Smooth Muscle Cell Medium (SMCM)
貨號(hào):1101
價(jià)格:¥2070.00
Sciencell平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基1101簡(jiǎn)介:
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基是專(zhuān)門(mén)為正常人類(lèi)平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計(jì)的適于其生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,,包含必需和非必需氨基酸,、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物,、激素,、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%),。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4,。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進(jìn)正常人類(lèi)平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長(zhǎng),并為其達(dá)到理想營(yíng)養(yǎng)平衡狀態(tài),。
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常見(jiàn)問(wèn)題問(wèn)答:
一,、血清或培養(yǎng)基產(chǎn)生了顏色或沉淀的問(wèn)題:
問(wèn):我用的是四季青的胎牛血清,,56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀,是不是污染,?還能不能 再用,?血清的生產(chǎn)日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日),。
答:應(yīng)該問(wèn)題不大。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中,,37℃過(guò)夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了,。血清中沉淀 物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,,也會(huì)存在于血清中,,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量,。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)能否加血清,?如果加了會(huì)有什么結(jié)果,?為什么懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)就不能加血清?
答:血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中重要的培養(yǎng)成份之一,,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有廣泛影響,。在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),我們通常會(huì)加入 10%的血清,。血清的質(zhì)量對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的成功至關(guān)重要,。一般說(shuō)來(lái),牛血清包括以下成分:生長(zhǎng)因子(如激素,,白細(xì)胞介 素等),,他們可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng);貼附因子,,他們可以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁,,往往只有細(xì)胞貼壁才能增值(懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞 除外);蛋白質(zhì)(如血清白蛋白,,球蛋白等),,既可以作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),又可以中止胰酶的作用,;還有很多成分不明的物 質(zhì),。血清還可以起到解毒作用,如脂肪酸,、重金屬和某些蛋白酶的毒性,。血清還可以是細(xì)胞免受機(jī)械損傷,。因此,無(wú) 論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞,,血清是*的,。除非因?qū)嶒?yàn)要求無(wú)血清培養(yǎng)時(shí),例如:為使細(xì)胞同步化時(shí),,我們會(huì) 采用無(wú)血清培養(yǎng)的,。單純的說(shuō)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)不能加血清就沒(méi)有太多的道理了。
三,、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理:
答:血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,,而血纖維蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解凍后,,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一,。但這些絮狀沉淀物,,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培 養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。
四,、如何避免沉淀物的產(chǎn)生,?
答:我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意下列的操作 :
(1)解凍血清時(shí),,請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),,若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃ 至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
(2)解凍血清時(shí),,請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。
(3)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,,血清會(huì)變得混濁,,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì) 因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,,可以無(wú)須做此步驟。
(5)若必須做血清的熱滅活,,請(qǐng)遵守56℃,,30 分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻,。溫度過(guò)高,,時(shí)間過(guò)久或搖 晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多,。