人氨肽酶N(APN)ELISA試劑盒蘇州千舍生物為您傾情供應(yīng),成熟技術(shù),,嚴格工藝流程,,*抗體/抗原,嚴格QC檢測后方可出庫,,請放心購買,!
人氨肽酶N(APN)ELISA試劑盒操作注意事項
1)試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,,不可保存。
2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì),。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用,。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6)洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水,。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
人氨肽酶N(APN)ELISA試劑盒操作步驟
1)使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時,。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7)每孔加入底物A、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8)取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。
人氨肽酶N(APN)ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2,、以吸光度OD值為縱坐標(Y),,相應(yīng)的待測物質(zhì)標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,,樣品的待測物質(zhì)含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度,。
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