產(chǎn)品名稱:雜項細胞犬正常腎細胞MDCK
細胞規(guī)格:1-3×10^6細胞量
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
培養(yǎng)液:90%DMEM(L)+10%FBS
凍存條件:80%*培養(yǎng)液+10%FBS+10%DMSO
運輸方式:常溫順豐運輸和干冰順豐運輸
貨 期:復蘇細胞需要1-2周,,凍存細胞的需要2-3天(特殊情況會有說明)
質(zhì) 控:無支原體、無污染,、符合標準
研究范圍:僅供科研使用
雜項細胞犬正常腎細胞MDCK
我司是一家專注于生命科學技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè),,在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力,,已成為國內(nèi)生命科學領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應商之一,,一站式采購商城,代理亞洲,、歐美國家300多種品牌,,200萬種以上產(chǎn)品。公司的服務和業(yè)務網(wǎng)絡遍及全國,,在同行獲得*,。
我司主要經(jīng)營產(chǎn)品是國內(nèi)傳代細胞和細胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO,、HyClone,、NTC、SIGMA,、 BI ,、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質(zhì)血清,。常規(guī)液體培養(yǎng)基,、胰酶、雙抗,、無血清凍存液,、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品,。售后完善,,我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購,!
我司以客戶為核心,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,,以售后服務求信譽,。我們通過不斷改進來提高效率,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價,。“誠信,、創(chuàng)新、嚴謹,、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,,共創(chuàng)輝煌!
一,、客戶收到細胞后需注意事項:
1,、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,,培養(yǎng)基是否漏出,,是否渾濁,如有請盡快聯(lián)系,。
2,、收到細胞,如包裝完好,,請在顯微鏡下觀察細胞,。由于運輸途中的影響,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,,應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁,。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理,。
3、收到細胞后,,請顯微鏡下觀察細胞,,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中,。棄掉原液,使用新鮮配制的*培養(yǎng)液,,使用進口胎牛血清,。剛接到細胞,,若細胞不多時血清濃度可以提高5%去培養(yǎng),。若細胞達到80%左右,血清濃度按照說明書要求進行調(diào)配,。
4,、收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,,如為貼壁細胞,,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),;超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng),。如為懸浮細胞,,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,,吸出上清,,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng),懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶,。
5,、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松,。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,,存放于4℃冰箱,以備不時之需,。
6,、24小時后,細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,,即可傳代,。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去,。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,,不超過5分鐘,??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,,見細胞脫落下來,,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,,使之*脫落,,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min,。棄上清,,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,,如細胞量多可一傳三,,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,,以具體細胞和經(jīng)驗為準,。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可,。
7,、貼壁細胞,懸浮細胞,。嚴格無菌操作,。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,,37℃,,5%CO2 培養(yǎng)。
二,、培養(yǎng)注意事項:
1,、實驗進行前,無菌室及無菌操作臺以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,,并開啟無菌操作臺風扇運轉(zhuǎn)10分鐘后,才開始實驗操作,。每次操作只處理一株細胞株,,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染,。實驗完畢后,,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后,,再進行下一個細胞系的操作,。
2、無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,,必要物品,,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,,其它實驗用品用完即應移出,,以利于氣流之流通。實驗用品以70% ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi),。實驗操作應在抬面之中央無菌區(qū)域,,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作,。
3,、工作人員應注意自身之安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗,。小心取用無菌之實驗物品,,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,,亦不要在打開的容器正上方操作實驗,。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,,傾斜約45°角取用,,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
三,、培養(yǎng)的相關(guān)知識:
1,、在細胞凍存時加入溫保護劑,能大大提高凍存效果,。常用的低溫保護劑是DMSO,,它是一種滲透性保護劑,可迅速透入細胞,,提高胞膜對水的通透性,,降低冰點,延緩凍結(jié)過程,,能使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外,,在胞外形成冰晶,減少胞內(nèi)冰晶,,從而減少冰晶對細胞的損傷,。
2、細胞的凍存:先將凍存管放入4℃冰箱,約40min,。接著置于-20℃冰箱,,約30-60min。再接著置于-80℃超低溫冰箱中放置,,置于液氮罐中長期保存,。同時做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄,。細胞的凍存和復蘇應遵守慢凍快融的原則,。
我公司所提供的實驗細胞及其子代,不能用于人體實驗和臨床診斷,、治療,。我公司細胞研究中心承諾盡大努力對實驗細胞資源相關(guān)信息進行及時更新。但限于當時的技術(shù)條件,,中心不保證其準確性,,從文獻等處引用的信息本中心未進行核實,僅供參考,,使用者在接收,、處理、保存,、丟棄,、轉(zhuǎn)讓及使用細胞的時候要遵守國內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風險和責任,,采取適當?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對健康或環(huán)境的危害,。本公司所有細胞入庫之前均經(jīng)過嚴格的細胞質(zhì)量檢測和鑒定,所有細胞在出庫之前均經(jīng)過一次嚴格的質(zhì)檢認證,,確保細胞到每一位用戶手里都是*狀態(tài),。我司匯集了一批專業(yè)的細胞生物學技術(shù)人員,以*的技術(shù)支撐產(chǎn)品,,歡迎廣大用戶選購,。