WINSERA無(wú)外泌體胎牛血清

在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,，胎牛血清（FBS）一直是不能缺少的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑,。然而,，傳統(tǒng)FBS中含有大量外泌體,，可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，特別是在干細(xì)胞研究、腫瘤微環(huán)境分析及外泌體相關(guān)實(shí)驗(yàn)中,。蘇州千舍生物科技有限公司推出的無(wú)外泌體特級(jí)胎牛血清（Exosome-Free FBS）,，通過(guò)超高速離心結(jié)合納米過(guò)濾技術(shù)，有效去除外泌體,，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,。

貨號(hào)： FBS050-EXO

規(guī)格：50ML

品牌：WINSERA

關(guān)鍵優(yōu)勢(shì)：

高純度：外泌體去除率>99%，避免外源性RNA,、蛋白質(zhì)干擾

高穩(wěn)定性：批次間差異極小,，適用于長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)

低內(nèi)毒素：<1 EU/mL，減少細(xì)胞毒性風(fēng)險(xiǎn)

外泌體的分離方法這么多,，選擇哪種更好,？

答：外泌體的分離純化一直是科研工作者關(guān)注的問(wèn)題，獲得高純度的外泌體對(duì)后續(xù)的研究至關(guān)重要,。據(jù)了解,，目前人們多采用超速離心、免疫磁珠,、 超濾,、 沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離：

1、 超速離心法（差速離心）超離法是常用的外泌體純化手段,，采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行（ 如圖所示） ，可分離到大小相近的囊泡顆粒,。超離法因操作簡(jiǎn)單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí),，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類(lèi)型有關(guān)）,，純度也受到質(zhì)疑；此外,，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量。

2,、密度梯度離心在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在 1.13-1.19g/ml

的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,，耗時(shí),。

3、超濾離心由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,，大于一般蛋白質(zhì),，利用不同截留相對(duì)分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離，便可獲得外泌體,。超濾離心法簡(jiǎn)單高效,，且不影響外泌體的生物活性，是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法,。

4,、磁珠免疫法外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如 CD63、 CD9 蛋白）,，用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,，即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高,、操作簡(jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低,，外泌體生物活性易受 pH 和鹽濃度影響,，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以廣泛普及,。

5,、PEG-base 沉淀法聚乙二醇（ PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒,，現(xiàn)在也被用來(lái)沉淀外泌體,，其原理可能與競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合游離水分子有關(guān)。利用PEG沉淀外泌體存在不少問(wèn)題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多（ 假陽(yáng)性）,，顆粒大小不均一，產(chǎn)生難以去除的聚合物,，機(jī)械力或者吐溫-20 等化學(xué)添加物將會(huì)破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時(shí)易受質(zhì)疑。

6、 試劑盒提取近幾年來(lái),，市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒，有的是通過(guò)特殊設(shè)計(jì)的過(guò)濾器過(guò)濾掉雜質(zhì)成分,，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來(lái)。