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細胞名稱:NCI-H2228 人肺癌細胞
貨號:WS60239(STR鑒定)
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
細胞介紹
人非小細胞肺癌細胞,,患者不吸煙,。細胞生長速度慢,傳代一次時間為10-15天,。每個批次均通過本庫支原體檢測,,結果為陰性,。在我?guī)焱ㄟ^STR檢測無誤。
STR鑒定結果為:Amelogenin: X; CSF1PO: 12; D13S317: 11; D16S539: 11,13; D5S818: 12; D7S820: 11; THO1: 7,8; TPOX: 11; vWA: 15,17,。
一,、細胞特性
1) 來源:人 肺
2) 形態(tài):上皮樣,貼壁細胞
3) 含量:>1x10^6 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用,。
二,、運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。
三、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備
STR鑒定結果:
Amelogenim:X Y
D5S818:9,,11
D13S317:8,11
D7S820:8,,12
D16S539:9,13
vWA:15,,17
THO1:9.3,,13
TPOX:8,18
CSF1PO:12,,13
H1細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)人胚胎干細胞
1.試劑和材料
H1細胞培養(yǎng)基試劑盒
成分 | 規(guī)格 | 數(shù)量 | 儲存條件 |
H1細胞基礎培養(yǎng)基 | 500mL | 1瓶 | 2-8℃ |
H1細胞培養(yǎng)基添加劑 | 20mL | 1支 | -20℃ |
四,、傳代方法
收到細胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況,。
(一)如果細胞未長滿,,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,,打開細胞培養(yǎng)瓶,,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。
(二)如果細胞已長滿,,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次,。
2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,用力拍打瓶壁,,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,,直至50-70%的細胞脫落后,,加入2ml 以上培養(yǎng)基中止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出一半,,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,,收到細胞后的第一次傳代一般是一傳二,。
注:
1、觀察細胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,,否則不能準確判斷細胞的傳代密度,。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下,。
2,、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素,。
3,、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,,可離心吹打后接種到新瓶內,。
4、收到細胞后,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們聯(lián)系,。
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