細胞名稱：人卵巢癌細胞（CAOV-3）

細胞介紹：細胞1976年建系,，來源于一位54歲白人女性的卵巢癌組織。

細胞特性：

1）來源：人,，卵巢癌組織

2）形態(tài)：貼壁,，上皮樣細胞

3）含量：>1x106

4）污染：支原體、細菌,、酵母和真菌檢測為陰性

5）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復蘇存活細胞方式：（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇,；（2）存活細胞,，收到后應繼續(xù)生長，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時,，再進行凍存,。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

收到細胞后請拍照,，3天內如果發(fā)現(xiàn)污染,，請及時拍照與我們聯(lián)系。

細胞用途：僅供科研使用,。細胞接收后的處理：

1）收到細胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們,。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收,，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的*培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng),。若細胞生長密度達70%-80%以上,，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收,。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。                      

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清,，10%,；P/S雙抗，1%,。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液,，*培養(yǎng)基重懸細胞,。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL,，T75瓶2-3mL）,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。

3. 輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例,；

1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml.

2. 1000rpm離心3-5min,，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,，按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,，標注好名稱、代數(shù),、日期等信息。

3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,，-80度冰箱中過夜,，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。

注意事項：

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內操作,，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏,，并會慢慢充滿液氮,。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害,。

卵巢癌是哪些因素引起的呢？

1,、家族遺傳

卵巢癌是具有遺傳性的,，尤其是染色體顯性遺傳，是會大大增加女性卵巢癌風險的,。家里有母親患卵巢癌的情況,，女兒患卵巢癌的可能性就會變大。

2,、激素影響

激素對卵巢上皮細胞有一定的刺激作用,，比如雌性激素和雄性激素，如果過多地使用含有雌性激素的藥物,，比如避孕藥,，是可能增加患卵巢癌的風險的。

3,、患有不孕癥

存在不孕癥的女性患者卵巢癌的風險是比較大的,，因為不孕癥說明女性可能存在一定的婦科疾病，未及時得到治療就會誘發(fā)卵巢癌,。

4,、子宮內膜異位癥

患有子宮內膜異位癥的患者，卵巢癌發(fā)生的風險會增加,，尤其是在月經期間,，沒有簡單的方法來將血液排出體外，就可能出現(xiàn)疼痛癥狀,，患卵巢癌的可能性也就越大,。

5、年齡因素

人在年齡逐漸增大的同時,，身體細胞和器官開始老化,，在飲食不健康和生活不衛(wèi)生情況的影響下，就可能導致卵巢癌的發(fā)生。

卵巢癌患者會有哪些癥狀表現(xiàn)呢,？

1,、月經紊亂

部分的卵巢癌患者會出現(xiàn)月經不正常的情況，當卵巢癌細胞逐漸增多的時候,，就會大大的影響女性的卵巢功能,，使患者出現(xiàn)月經量減少或者是不來月經的癥狀表現(xiàn)。

2,、腹脹

卵巢癌患者會有腹脹等腸胃不適的表現(xiàn),，因為腫瘤在增長的同時，會擠壓到周圍的組織,，導致腹腔和胸腔受到一定的壓迫,，從而表現(xiàn)出腹脹的癥狀。

3,、劇烈腹痛

當腫瘤細胞在增長的過程中出現(xiàn)破裂,、扭轉等情況時，是可能產生劇烈的腹部疼痛感覺的,，在出現(xiàn)這個癥狀時,，要及時的去醫(yī)院治療，以免造成不必要的影響,。

4,、下肢水腫

卵巢腫瘤隨著體積增大到一定程度的時候，是會壓迫到盆腔靜脈的,，從而導致血液流通不暢,、下肢水腫等情況的出現(xiàn)。

以上這些就是常見的卵巢癌病因和癥狀表現(xiàn),，女性應該做好預防措施,，尤其是在患婦科疾病時，要及時的采取措施來治療,，以免誘發(fā)卵巢癌,。患卵巢的女性還要注意飲食和生活習慣上的調整,，幫助疾病更快地恢復,。

人高轉移鼻咽癌細胞系 5-8F 1640+10%FBS+1%P/S   貼壁生長

人鼻咽癌細胞 C666-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長

人鼻咽癌細胞 NPC/HK-1 1640+10%FBS +1%P/S 貼壁生長

豬鼻甲黏膜成纖維細胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長

人卵巢癌細胞 A2780 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S  

人卵巢癌細胞+GFP A2780+GFP 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S  

人卵巢腺癌細胞 CAOV-3 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞 CoC1 1640+10%FBS+1%P/S  

人卵巢透明細胞癌細胞 ES-2 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞 HEY DMEM+10%FBS+1%P/S  

人卵巢癌細胞 HEY A8 DMEM+10%FBS+1%P/S

人高轉移卵巢癌細胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S

人正常卵巢上皮細胞系 IOSE-80（IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN） 1640+10%FBS+1%P/S

人卵巢顆粒細胞瘤細胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S

人卵巢腺癌細胞 OVCAR-3 1640(含NaHCO3 1.5g/L)+20%FBS+1%P/S + 0.01mg/ml牛胰島素

人卵巢癌細胞 SK-OV-3 Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌細胞熒光素酶標記 SK-OV-3+LUC Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S  

倉鼠卵巢細胞 CHO DMEM+10%FBS+1%P/S

倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr- IMDM+10%FBS+P/S1%+0.05mM次+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤。

中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1 F12K+10%FBS+1%P/S

中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 CHO-K1（懸?。?/span> CHO GROW CD2培養(yǎng)基+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

中國倉鼠卵巢細胞 CTLA4 IG-24 DMEM+10%FBS+0.2mM脯氨酸+0.001mM氨甲蝶呤+1%P/S

倉鼠卵巢細胞 LEC-1 MEMα+10%FBS+1%P/S