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胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基,,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),,具有極為重要的功能。
1.提供對維持細胞指數生長的激素,,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結合蛋白,,能識別維生素,、脂類、金屬和其他激素等,,能結合或調變它們所結合的物質活力,。
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用,。
4.是細胞貼壁,、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用,。
6.提供蛋白酶抑制劑,,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害,。
一、內毒素
內毒素是革蘭氏陰性菌的細胞壁外壁層上的*成分,。當細菌死亡自溶或粘附在其它細胞時,,才表現其毒性。內毒素直接參與細胞凋亡,,血清中內毒素含量越低,,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代,;內毒素含量過高,,會直接導致細胞提前老化。國際上規(guī)定,,胎牛血清的級別,,應以內毒素水平的高低來確定,其中,,特級胎牛血清的內毒素應<10EU/ml
二,、血紅蛋白含量
胎牛血清的顏色會根據血紅蛋白含量的不同表現出黃色、淡黃色,、橘紅色,、微紅色等。細胞培養(yǎng)用血清的標準是血紅蛋白含量不高于20mg/dl,,顏色越紅,,數值越高,;反之,數值越低,。實際上,,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響。這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規(guī)范程度,,良好的操作能降低血清的溶血,。
三、總蛋白含量
胎牛血清的總蛋白含量一般范圍是30-40mg/ml,,數值偏高,,說明采血的牛齡偏大,,不是胎牛,;數值偏低,表明血清可能摻水了,。
四,、pH值
根據藥典,胎牛血清的pH值在7.0-8.0之間,,并沒有什么具體依據把進口血清和國產血清用7.5這個分界線界定,。
五、滲透壓
胎牛血清滲透壓的檢測一般采用冰點法,,滲透壓摩爾濃度(mOsmol/kg):280-360之間
六,、微生物
包括細菌、霉菌,、支原體,、噬菌體等。隨著各個品牌血清生產條件的改善提高,,細菌,、霉菌等“大型"微生物幾乎能100%控制。支原體通過0.1um3次無菌過濾去除,。如CellMax胎牛血清,,3次0.1um無菌過濾以后,又通過培養(yǎng)法和DNA染色法進行支原體檢測,,結果均呈現陰性才會放行銷售,。關于噬菌體主要是生產環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,,很難*清除,,但對血清質量影響不大,不過對于工業(yè)生產的客戶來說,,往往會采用γ照射的胎牛血清來避免噬菌體,。
七,、免疫球蛋白
免疫球蛋白的數值能*體現出采血時的牛齡情況,新生牛血清容易產生IgM,,IgG的含量也偏高,;胎牛血清不含IgM,IgG的含量也較低,??梢酝ㄟ^血清蛋白電泳SDS檢測。
低IgG的胎牛血清推薦適用于抗體生產及相關領域,。
培養(yǎng)細胞死亡
可能原因:
1.培養(yǎng)箱內無CO2,;
2.培養(yǎng)箱內溫度波動太大;
3.細胞凍存或復蘇過程中損傷,;
4.培養(yǎng)液滲透壓不正確,;
5.培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積 。
解決方法:
1.檢測培養(yǎng)箱內CO2,;
2.檢查培養(yǎng)箱內溫度,;
3.取新的保存細胞種;
4.檢測培養(yǎng)液滲透壓,;
5.換入新鮮培養(yǎng)液,。
WINSERA®胎牛血清 | 貨號 | 規(guī)格 | 庫存狀態(tài) |
優(yōu)級 | FBS500-WS-002 | 500ML | 現貨 |
特級 | FBS500-WP-002 | 500ML | 現貨 |
ES級別 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現貨 |
無外泌體血清 | FBS050-EXO | 50ML | 現貨 |
WINSERA®特級胎牛血清適合培養(yǎng)哪些細胞?
1,、特級胎牛血清具有非常的促細胞生長能力,,適合培養(yǎng)腫瘤細胞,原代細胞,,部分干細胞和嬌貴細胞,。
2、血清如何保存, 可以放多久,?
3,、貯藏溫度≤-15℃,可長時間保存,; 4℃存放時,,請勿超過一個月。
4,、血清溶解以后,,出現沉淀怎么辦?
5、若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內,,以400-600g離心5min,上清液即可加入培養(yǎng)基內一起培養(yǎng)。 我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,, 一方面它可能會阻塞您的過濾膜,;另一方面,過濾血清這種行為可能會導致血清中部分營養(yǎng)成分的流失,。
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