首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁,，基本可以確定是污染,；如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則，是否運動,，是做布朗運動還是呈直線型快速移動,。如果黑點大小不規(guī)則，做布朗運動,，黑點可能是細胞碎片（可能是細胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的）,，也可能是血清反復凍融產生的蛋白沉淀引起的,，也可能是細胞的代謝產物。如果黑點大小一致,，快速移動,，很可能是細菌污染,。

掌握細胞傳代的最佳時機，不要細胞長老了再傳代,；掌握好消化時間,，防止消化過度產生細胞碎片；減少血清等試劑的凍融次數(shù),；將培養(yǎng)液的PH調到最佳；嚴格控制水質和器皿的清潔,。

如果判定黑點是污染,，請及時將細胞處理后丟棄。其他情況,，可參照以下進行：

如果是懸浮細胞：收集細胞上清慢速離心（500-600 rpm/min,，5-6 min）并更換新的培養(yǎng)瓶；如果是貼壁細胞：將細胞用PBS洗2-3遍,，洗的時候，輕輕拍打培養(yǎng)瓶,，讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,，再棄去PBS,，消化時先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右,，讓細胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來，去掉低濃度胰酶,，然后正常消化細胞,，將收集的細胞懸液慢速離心（500-600 rpm/min，5-6 min）并更換新的培養(yǎng)瓶,，并可以嘗試適當增加血清濃度進行培養(yǎng)。