研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳,。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細(xì)胞有嚴(yán)重影響,。解凍過程錯誤,。冷凍細(xì)胞解凍后,，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞,。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久,。

一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長是正?，F(xiàn)象，大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,，很可能會出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長的現(xiàn)象，聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,，殃及周圍的懸浮細(xì)胞,，因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時需控制好細(xì)胞密度,。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán)，可以通過細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),，也可以嘗試一下方法：將細(xì)胞懸液收集到15 ml離心管中，靜置20 min左右，小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)（該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán)）,。

部分細(xì)胞本身存在一定的空泡（如HepG2,，Ishikawa及一些耐藥株等），這個是正?，F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細(xì)胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,，則很可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳,，可以通過調(diào)整血清濃度，控制消化,，控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細(xì)胞狀態(tài)；如果大部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡,，且單個細(xì)胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,，則可能細(xì)胞代次較高，細(xì)胞老化所致,，需更換代次較早的細(xì)胞,。