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當前位置:蘇州千舍生物科技有限公司>>技術文章>>胎牛血清常見問題集合~
① 保存血清最好方法是什么,?
我們建議血清應保存在-5℃至-20℃,。但是若存放于4℃時,,請勿超過一個月,。若您一次無法用完一瓶,,建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臒o菌容器內(nèi),再放回冷凍,。反復凍融會對血清的品質(zhì)造成不良影響,。
② 如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
我們建議您將血清從冷凍箱取出后,,先置于2-8℃冰箱使之溶解,,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻,。
③ 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理?
血清在解凍過程(包括沒有*解凍)或儲存在2-8℃時,,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如凝集素,、纖維蛋白原和玻連蛋白等)可能會聚集成團,形成絮狀沉淀或外觀混濁,;在運輸過程中,,由于時間較長,所以往往有少許解凍,,因此也可能稍有沉淀,,但這些都不影響血清性能。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞過濾膜。
④ 何謂熱滅活,?
一般是以56℃,,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,,可以使補體去活化,,而補體所參與的反應有:溶細胞,平滑肌的收縮,,肥大細胞和血小板組胺的釋放,,增強吞噬作用,淋巴細胞,、巨噬細胞的趨化和激活,。
⑤ 有必要作熱滅活嗎?
實驗顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,,或*沒有任何作用,,甚至通常因為高溫處理影響了血清質(zhì)量,而造成細胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱滅活的血清,,沉淀物的形成,會顯著增多,,這些沉淀物在導致顯微鏡下觀察,,像是“小黑點",,常常會讓研究者認為血清遭受污染,而把血清放進37℃環(huán)境中,,又會使此沉淀物更增多,,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議您,,若非必須,,您可以不做熱滅活處理血清。這樣,,不僅節(jié)省您寶貴時間,,更確保血清的質(zhì)量。只在做免疫學研究或培養(yǎng)干細胞,,昆蟲細胞和平滑肌細胞時才推薦做熱滅活,。我公司也有已經(jīng)熱滅活的血清可供選擇。
⑥ 如何減少沉淀物的產(chǎn)生,?
我們建議您在使用血清的時候,,注意下列的操作:
● 解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),,若血清解凍時,,改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物,。
● 解凍血清時,,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。
● 請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,,而影響血清的質(zhì)量,。
● 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,則毋須做此步驟,。
若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,,30分鐘的原則,,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多,。
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