詳細介紹
細胞遷移劃痕細胞生物學(xué)實驗介紹
細胞劃痕(修復(fù))法是一種簡捷的測定細胞遷移運動與修復(fù)能力的方法,類似體外傷口愈合模型,。在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細胞上,,用微量槍頭或其他硬物在細胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線,去除中央的細胞,,然后繼續(xù)培養(yǎng)細胞至設(shè)定時間(采用無血清或低血清(<2%)排除細胞增殖的影響),,取出培養(yǎng)板,觀察周邊細胞是否生長(修復(fù))至中央劃痕區(qū),,以此判斷細胞的生長遷移能力,。通常設(shè)定正常對照組與實驗組,實驗組中添加某些處理因素或藥物,、外源性基因等,,通過不同分組之間的細胞對于劃痕區(qū)的修復(fù)能力,,判斷比較各組細胞的遷移與修復(fù)能力,。
細胞遷移劃痕細胞生物學(xué)實驗介紹內(nèi)容
1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,,均勻的劃橫線,,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔,。每孔至少穿過5條線,。
2.在孔中加入約5×105個細胞,培養(yǎng)細胞至匯合度達到90%以上,。
3.用槍頭比著直尺,,垂直于背后的橫線劃痕。
4.PBS洗細胞3次,去除劃下的細胞,,加入無血清培養(yǎng)基,。
5.放入37℃5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0,,12,,24,48h時間點取樣,,100倍鏡下拍照,。如果細胞遷移(修復(fù))能力較強,需相應(yīng)縮短觀察時間間隔,。(一般選取兩個時間點)
客戶需知
1),、客戶需提供生長狀態(tài)良好的實驗細胞及細胞培養(yǎng)條件;
2),、客戶需準確告知實驗設(shè)計內(nèi)容,,如樣本采樣時間點等。
實驗周期
20個工作日(具體實驗周期視實驗設(shè)計方案而異)
收費標準
歡迎咨詢創(chuàng)凌生物,!