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NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)在EDTA抗凝血中應(yīng)用第2篇

血常規(guī)檢測中最經(jīng)常使用的就是EDTA抗凝血,，它能夠用于血細(xì)胞形態(tài)、生化檢測、血型鑒定、標(biāo)志物檢測,、基因篩查等,。常見的基因篩查都涉及到核酸提取和擴(kuò)增。檢驗(yàn)科或者實(shí)驗(yàn)室最常使用的方法就是離心柱或者磁珠提取法進(jìn)行DNA或者RNA提取,。但是以上方法有以下盲點(diǎn)：

1,、離心柱提取無法自動化，一次提取量受限于離心機(jī)規(guī)模,，而且無法高通量操作,；

2、磁珠提取法雖然能夠高通量,，但是設(shè)備昂貴,；

3、離心柱或者磁珠提取血量一般不低于200-300µL,；

4,、離心柱提取的核酸含量比較高,，而磁珠依據(jù)廠家不同得率不穩(wěn)定,；

5、前處理時間比較長,；

6,、離心柱的批間差異相對于磁珠更好控制；

綜上所述,，兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),，在通量、效率,、自動化上很難兩全,。鑒于此情況，我司開發(fā)的NuSmart^®核酸直接釋放技術(shù)和EDTA血檢測相結(jié)合,，僅需要10-20抗凝血,，同時可以處理百份甚至千份血液。所含試劑中不包含有生物酶制劑,，例如蛋白酶K,，所以批間差異很小?？偨Y(jié)如下：

— EDTA血量少

— 5分鐘處理

— 高通量樣本量

— 無腦操作

— 無需大型設(shè)備

 

操作流程

 

案例A 不同體積人EDTA抗凝血處理后擴(kuò)增4對引物

 

1,、0.1μL   2、1μL   3,、10μL   4,、20μL   5、50μL   6,、100μL   7,、200μL

使用NuSmart^®血液 PCR 試劑盒Plus（貨號Nu-B02）處理不同體積人EDTA抗凝血,，使用2×Master TaqMix(With Dye)分別擴(kuò)增4對引物。

 

案例B 人EDTA抗凝血處理后在50μL體系下擴(kuò)增

 

1,、1μL   2,、2μL   3、5μL   4,、10μL   5,、15μL   6、20μL   7,、23μL

使用NuSmart^®血液 PCR 試劑盒Plus（貨號Nu-B02）處理10μL人EDTA抗凝血,。在50μL擴(kuò)增體系中，使用1μL到23μL模版體積擴(kuò)增4對引物,。