目錄:北京佰司特科技有限責(zé)任公司>>分子生物學(xué)>>蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析儀>> PSA-16蛋白分析儀
| 產(chǎn)地類別 | 國產(chǎn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 食品,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
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蛋白分析儀-PSA-16
技術(shù)原理：
蛋白質(zhì)是生物體中廣泛存在的一類生物大分子，具有特定立體結(jié)構(gòu)的和生物活性以及諸多功能,，根據(jù)這些功能我們可以將其應(yīng)用于蛋白質(zhì)的分子設(shè)計,、蛋白質(zhì)功能的改造、疾病的基因治療以及新型耐抗藥性藥物的開發(fā)與設(shè)計甚至是發(fā)現(xiàn)生物進(jìn)化的規(guī)律等良好科研領(lǐng)域上,。因此,，蛋白質(zhì)具有非常重要的研究價值,。
進(jìn)行蛋白質(zhì)性質(zhì)和功能研究的前提是獲得穩(wěn)定的蛋白質(zhì)樣品,，而由于蛋白質(zhì)自身性質(zhì)的復(fù)雜性，難以保證獲得的蛋白質(zhì)樣品是否具有正確的三維結(jié)構(gòu)以及功能,，因此急需一種技術(shù)手段或設(shè)備,，對蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性進(jìn)行分析，確定獲得蛋白質(zhì)適宜的緩沖液條件,、蛋白質(zhì)的長期儲存穩(wěn)定性等,。另外在進(jìn)行蛋白質(zhì)-配體小分子相互作用研究時，因為需要篩選的小分子配體數(shù)量巨大,，因此也急需一種技術(shù)手段或設(shè)備,，可以高通量的對配體結(jié)合進(jìn)行篩選。
蛋白中的色氨酸和酪氨酸可以被280 nm的紫外光激發(fā)并釋放出熒光,，其熒光性質(zhì)與所處的微環(huán)境密切相關(guān),。蛋白變性過程中，色氨酸從疏水的蛋白內(nèi)部逐漸暴露到溶劑中,，熒光釋放的峰值也從330 nm逐漸轉(zhuǎn)移到350 nm,。
差示掃描熒光法(differential scanning fluorimetry, DSF)是一種方便快捷的高通量藥物篩選及靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)的方法,，通過熒光染料或蛋白內(nèi)源熒光信號監(jiān)測升溫過程中蛋白構(gòu)象的變化計算其熔解溫度Tm（折疊蛋白與去折疊蛋白相等時的溫度）。該方法具有蛋白樣品損耗少,、通量高,、溫度變化范圍廣及數(shù)據(jù)準(zhǔn)確等優(yōu)點，被廣泛用于蛋白質(zhì)穩(wěn)定性（蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性參數(shù)及其影響因素）,、蛋白結(jié)構(gòu)和構(gòu)象,、蛋白-配體相互作用及蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑、抑制劑,、輔助因子等領(lǐng)域的研究,。
染料法DSF是常用的是SYPRO Orange染料，SYPRO Orange 是一種環(huán)境敏感的疏水染料,，當(dāng)溫度升高時,，蛋白去折疊，疏水部分暴露出來,，染料與蛋白質(zhì)的疏水部分特異性結(jié)合,，熒光增強(qiáng)。在有特定化合物或配體結(jié)合的情況下,，蛋白穩(wěn)定性會上升,，表現(xiàn)為熔解溫度的上升。
內(nèi)源DSF（intrinsic DSF）則是基于蛋白去折疊過程中色氨酸發(fā)射光譜的位移進(jìn)行檢測,。通過檢測溫度變化/變性劑濃度變化過程中蛋白內(nèi)源紫外熒光（350 nm/330 nm比值）的改變,，獲得蛋白的熱穩(wěn)定性(Tm值)、化學(xué)穩(wěn)定性（Cm值）等參數(shù),。相比傳統(tǒng)的方法,，無需添加染料，通量高,，樣品用量少,，數(shù)據(jù)精度高。
蛋白分析儀-PSA-16蛋白中的色氨酸和酪氨酸可以被280 nm的紫外光激發(fā)并釋放出熒光,，其熒光性質(zhì)與所處的微環(huán)境密切相關(guān),。蛋白變性過程中，色氨酸從疏水的蛋白內(nèi)部逐漸暴露到溶劑中,，熒光釋放的峰值也從330 nm逐漸轉(zhuǎn)移到350 nm,。
內(nèi)源差示掃描熒光技術(shù)（intrinsic fluorescence DSF），通過檢測溫度變化/變性劑濃度變化過程中蛋白內(nèi)源紫外熒光（350 nm/330 nm比值）的改變,，獲得蛋白的熱穩(wěn)定性(Tm值),、化學(xué)穩(wěn)定性（Cm值）等參數(shù)。相比傳統(tǒng)的方法,，無需添加染料,，通量高,，樣品用量少，數(shù)據(jù)精度高,。
產(chǎn)品介紹：
蛋白分析儀PSA-16是一款無需加入熒光染料,、高通量、低樣品消耗量檢測蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的設(shè)備,。該設(shè)備基于內(nèi)源差示掃描熒光技術(shù)（intrinsic fluorescence DSF）,，通過檢測溫度變化/變形劑濃度變化過程中蛋白內(nèi)源紫外熒光的改變，獲得蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性(Tm值),、化學(xué)穩(wěn)定性（Cm值）等參數(shù),。可應(yīng)用于蛋白緩沖液條件篩選及優(yōu)化,、小分子與蛋白結(jié)合情況的定性測定,、蛋白質(zhì)修飾及改造后的穩(wěn)定性測定、蛋白變/復(fù)性研究,、不同批次間蛋白穩(wěn)定性對比等多個方面,。
基于內(nèi)源差示掃描熒光技術(shù)（intrinsic fluorescence DSF），在無需添加外源染料的條件下,，對蛋白進(jìn)行升溫變性,，通過內(nèi)源熒光和散射光的變化與三級結(jié)構(gòu)變化的關(guān)系，PSA-16可用于測定不同buffer中蛋白的Tm值變化,，獲得蛋白質(zhì)正確折疊的ZUI YOUbuffer條件,；測定不同detergent條件下膜蛋白Tm值，進(jìn)行detergent篩選,；測定不同添加劑對蛋白穩(wěn)定性的影響,；測定添加配體后Tm值變化進(jìn)行配體結(jié)合篩選；測定蛋白中變性部分的比例,，進(jìn)行質(zhì)量控制,；測定蛋白Tm值與濃度的相關(guān)性,，獲得 ZUI YOU的蛋白濃度進(jìn)行后續(xù)結(jié)晶等實驗,；測定蛋白去折疊過程，進(jìn)行蛋白復(fù)性條件篩選,；測定蛋白folding enthalpy,，研究蛋白的長期穩(wěn)定性；測定不同批次和存儲后的蛋白的穩(wěn)定性,，并進(jìn)行相似性評分,，對蛋白進(jìn)行質(zhì)量控制。
多功能蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析儀PSA-16,，無需對蛋白進(jìn)行熒光標(biāo)記,，可以直接測定蛋白在不同緩沖液條件中的Tm值,，進(jìn)行緩沖液篩選和優(yōu)化；同時還可以測定添加不同配體化合物對蛋白穩(wěn)定性的影響,，通過Tm值變化進(jìn)行配體結(jié)合篩選,。PSA-16滿足我們目前對于蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析的迫切需求。
★ 280nm激發(fā)光下,，蛋白以色氨酸(Trp)釋放的紫外熒光為主
★ Trp熒光光譜與其所處微環(huán)境密切相關(guān)
★ 折疊狀態(tài)Trp在蛋白內(nèi)部疏水核心,；蛋白去折疊后，Trp暴露到溶劑中
★ 去折疊過程, Trp Emission峰值從330nm轉(zhuǎn)變到350nm,，蛋白紫外熒光發(fā)生紅移現(xiàn)象
★ 350nm與330nm熒光值的比值變化,，即可檢測到蛋白去折疊過程
★ 測定參數(shù)：Tm、Ton,、Cm,、ΔG等
★ 條件無限制，可測定去垢劑環(huán)境中的膜蛋白
主要功能：
蛋白分析儀-PSA-16可用于評估蛋白（抗體或疫苗）熱穩(wěn)定性,、化學(xué)穩(wěn)定性,、顆粒穩(wěn)定性等特性，實現(xiàn)非標(biāo)記條件下的高通量的抗體制劑篩選,、分子結(jié)構(gòu)相似性鑒定,、物理穩(wěn)定性、長期穩(wěn)定性,、質(zhì)量控制,、折疊和再折疊動力學(xué)研究等功能。
★ 蛋白熱穩(wěn)定性分析
★ 蛋白化學(xué)穩(wěn)定性分析
★ 蛋白等溫穩(wěn)定性分析
★ 蛋白顆粒穩(wěn)定性分析
★ 免標(biāo)記熱遷移實驗（dye-free TSA）
★ 蛋白去折疊,、再折疊,、結(jié)構(gòu)相似性分析
★ 蛋白質(zhì)量控制分析
主要特點：
蛋白分析儀-PSA-16基于內(nèi)源差示掃描熒光（ifDSF）技術(shù)，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)穩(wěn)定性研究,、蛋白質(zhì)類大分子藥物（抗體）優(yōu)化工程,、蛋白質(zhì)類疾病靶點的藥物小分子篩選和結(jié)合力測定等領(lǐng)域，具有快速,、準(zhǔn)確,、高通量等諸多優(yōu)點。蛋白質(zhì)中色氨酸/酪氨酸的熒光性質(zhì)與它們所處的環(huán)境息息相關(guān),，因此可以通過檢測蛋白內(nèi)部色氨酸/酪氨酸在加熱或者添加變性劑過程中的熒光變化,，測定蛋白質(zhì)的化學(xué)和熱穩(wěn)定性。PSA-16采用紫外雙波長檢測技術(shù),，可精準(zhǔn)測定蛋白質(zhì)去折疊過程中色氨酸和酪氨酸熒光的變化,，獲得蛋白的Tm值和Cm值等數(shù)據(jù)；測定時無需額外添加染料,，不受緩沖液條件的限制且測試的蛋白質(zhì)樣品濃度范圍非常廣（10 µg/ml - 250 mg/ml）,，因此可廣泛用于去垢劑環(huán)境中的膜蛋白和高濃度抗體制劑的穩(wěn)定性研究,。此外，PSA-16具有非常高的數(shù)據(jù)采集速度,，從而可提供超高分辨率的數(shù)據(jù),。同時PSA-16一次最多可同時測定16個樣品，通量高,；每個樣品僅需要15 uL,，樣品用量少，非常適合進(jìn)行高通量篩選,。PSA-16操作簡單,，使用后無需清洗，幾乎無維護(hù)成本,。
主機(jī)參數(shù)：
★ 測定參數(shù)：Tm,、Cm、ΔG等,；
★ 樣品通量：16個,；
★ 樣品體積：≤20 uL；
★ 檢測器：檢測330+/-5 nm和350+/-5 nm兩個波長的信號,；
★ 檢測模式：快速逐個掃描,，1秒鐘采集一次信號；
★ 激發(fā)光源：LED,，波長280 nm,；
★ 蛋白檢測濃度范圍：0.01-200 mg/ml；單次實驗即可涵蓋此濃度范圍,；
★ 測定過程無需外源染料,，無需標(biāo)記；
★ 溫控范圍：15-110度,；
★ 變溫速度：0.1-15度/分鐘,；
★ 溫度準(zhǔn)確性：+0.05度；
★ Tm重復(fù)性：同一臺機(jī)器16個重復(fù)樣品CV小于1%,；
★ 對緩沖液條件無限制,，可測定去垢劑環(huán)境中的膜蛋白；
★ 能夠?qū)崿F(xiàn)熱穩(wěn)定性,、化學(xué)穩(wěn)定性,、膠體穩(wěn)定性、等溫穩(wěn)定性,、質(zhì)量控制等測定；
★ 儀器無需定期更換配件,，實驗完成后無需對儀器進(jìn)行清洗維護(hù),；
耗材參數(shù)：
★ 耗材：塑料一次性耗材,，無需清洗和維護(hù)；成本小于10人民幣/樣品,；
★ 樣品管采用高純度石英材質(zhì),，紫外透過率高，可檢測低濃度的蛋白樣品
★ 一次性耗材樣品管,，樣品不接觸儀器內(nèi)部,，無需清洗和再生
★ 八聯(lián)排設(shè)計，使用靈活,，適配多通道移液器進(jìn)樣
★ 可密封式設(shè)計,，防止實驗過程中的樣品蒸發(fā)
應(yīng)用領(lǐng)域：
蛋白分析儀-PSA-16應(yīng)用涵蓋植物、生物學(xué),、動物科學(xué),、動物醫(yī)學(xué)、微生物學(xué),、工業(yè)發(fā)酵,、環(huán)境科學(xué)、農(nóng)業(yè)基礎(chǔ),、蛋白質(zhì)工程等多學(xué)科領(lǐng)域,。蛋白質(zhì)是最終決定功能的生物分子，其參與和影響著整個生命活動過程?，F(xiàn)代分子生物學(xué),、環(huán)境科學(xué)、動醫(yī)動科,、農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)等多種學(xué)科研究的很多方向都涉及蛋白質(zhì)功能研究,，以及其下游的各種生物物理、生物化學(xué)方法分析,，提供穩(wěn)定的蛋白質(zhì)樣品是所有蛋白質(zhì)研究的先決條件,。因此多功能蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析系統(tǒng)在各學(xué)科的研究中都有基礎(chǔ)性意義。
1. 抗體或疫苗制劑,、酶制劑的高通量篩選
2. 抗體或疫苗,、酶制劑的化學(xué)穩(wěn)定性、長期穩(wěn)定性評估,、等溫穩(wěn)定性研究等
3. 生物仿制藥相似性研究（Biosimilar Evaluation）
4. 抗體偶聯(lián)藥物（ADC）研究
5. 多結(jié)構(gòu)域去折疊特性研究
6. 物理和化學(xué)條件強(qiáng)制降解研究
7. 蛋白質(zhì)變復(fù)性研究（復(fù)性能力,、復(fù)性動力學(xué)等）
8. 膜蛋白去垢劑篩選，膜蛋白結(jié)合配體篩選（Thermal Shift Assay）
9. 基于靶標(biāo)的高通量小分子藥物篩選（Thermal Shift Assay）
10. 蛋白純化條件快速優(yōu)化等
測試數(shù)據(jù)：
蛋白分析儀-PSA-16推出市場后,，在短短時間內(nèi)測試過各種不同類型的樣本,，在多個客戶實驗室進(jìn)行現(xiàn)場DEMO，數(shù)據(jù)顯示測試結(jié)果良好，重復(fù)性優(yōu)異,，相關(guān)參數(shù)達(dá)到甚至超過國外同類產(chǎn)品的水平,。
北京佰司特科技有限責(zé)任公司
類器官串聯(lián)芯片培養(yǎng)儀-HUMIMIC；單分子質(zhì)量光度計-TwoMP,；灌流式細(xì)胞組織類器官代謝分析儀-IMOLA,；光片顯微鏡-LSM-200；超高速視頻級原子力顯微鏡-HS-AFM,；蛋白分析儀-PSA-16,；全自動半導(dǎo)體式細(xì)胞計數(shù)儀-SOL COUNT；農(nóng)藥殘留定量檢測儀（臺式）—BST-100,；農(nóng)藥殘留定量檢測儀（手持式）—BST-10A,；藍(lán)光/綠光LED凝膠成像；臺式原子力顯微鏡-ACST-AFM,；微納加工點印儀-NLP2000/DPN5000
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