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輝瑞/BioNTech在新冠mRNA疫苗的生產(chǎn)過程中使用到HEPES,,同時審評報告反復強調(diào)了該輔料的無RNase的關(guān)鍵屬性,。
結(jié)合2016年BioNTech發(fā)表LPX-mRNA制劑的文章中mRNA原液中所采用的buffer為HEPES,,基本可以推斷BioNTech采用HEPES作為原液中的buffer且已獲批上市的疫苗原液采用HEPES作為緩沖對,。
英國帝國理工大學醫(yī)學院傳染病系系主任Robin Shattock是mRNA預防性疫苗領(lǐng)域的專家,,與BioNTech以及PNI等公司都有較為密切的合作。其團隊2021年發(fā)表關(guān)于saRNA體外轉(zhuǎn)錄體系優(yōu)化的文章中,,考察篩選了影響saRNA體外轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵影響因素,,最終確定了采用40mM濃度的HEPES作為IVT反應體系buffer,具有更優(yōu)的體外轉(zhuǎn)錄效果,。
四,、使用HEPES緩沖體系時的注意事項
1、由于pai嗪基團的存在,,當HEPES暴露于光線中時,,會產(chǎn)生H2O2,這對培養(yǎng)的細胞或其它有生物活性的物體產(chǎn)生毒性,,同時對氧化還原敏感的物質(zhì)不宜共同使用,,因此HEPES作為緩沖液的操作應盡量在避光條件下進行。
2,、HEPES在生化領(lǐng)域常見的使用濃度為10-25mM,,當濃度低于10mM時緩沖能力較弱,不能起到較好的緩沖效果,,當濃度較高時對一些細胞可能具有毒害作用,。
艾偉拓長期穩(wěn)定供應注射級海藻糖、蔗糖,、TRIS/TRIS-HCl,、HEPES等生物保護劑與緩沖鹽,GMP條件生產(chǎn),,中美雙報,,供注射用,超低內(nèi)毒素,,DNase& RNase free,,符合國際主流藥典標準,助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗,、腺病毒載體疫苗,、脂質(zhì)體、單雙抗,、抗體偶聯(lián)藥物等生物制劑生產(chǎn)與中外申報,!
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