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當(dāng)前位置:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司>>技術(shù)文章>>艾偉拓科普:常見緩沖液HEPES
緩沖溶液是許多生化反應(yīng),、生產(chǎn),、實(shí)驗(yàn)過程中的重要溶液,,對穩(wěn)定溶液的酸堿度有重要的影響,。對于絕大多數(shù)生物制劑(如疫苗、抗體,、ADC偶聯(lián)藥物,、脂質(zhì)體等)而言,實(shí)驗(yàn)操作,、實(shí)際生產(chǎn)以及生物體內(nèi)的生化反應(yīng)等都需要在特定的pH值范圍內(nèi)才能正常有效地進(jìn)行,,從而得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)論或發(fā)揮好的治療效果。
HEPES就是這其中一款常用的緩沖液,。
4-qiang乙基paiqin乙磺酸(簡稱HEPES),,分子式為C8H18N2O4S。分子結(jié)構(gòu)中既含有酸性的磺酸基(-SO3H),,又含有兩個堿性叔胺氮,,所以呈現(xiàn)兩性,可用來配制兩性離子緩沖液,。該緩沖溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸餾水中,,再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至適當(dāng)值。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2,。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對其pH值影響不大,,因此能夠較長時間維持穩(wěn)定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈現(xiàn)較強(qiáng)的酸性,,易給出H+,;兩個叔胺氮各含有一個孤對電子,呈現(xiàn)堿性,,可以接受H+生成季銨鹽,。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互為緩沖對。而且,,單個HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可傳遞H+生成內(nèi)鹽,,即兩性離子,。在水溶液中,HEPES分子,、內(nèi)鹽以及磺酸基和叔胺各自產(chǎn)生的離子之間因H+或OH-的轉(zhuǎn)移而能夠相互轉(zhuǎn)化建立平衡關(guān)系,,憑借該平衡關(guān)系的移動來抵御外來酸堿的影響來調(diào)節(jié)溶液pH值穩(wěn)定,所以具有緩沖作用,,其平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系見下圖,。
HEPES 緩沖溶液具有對細(xì)胞無毒性、不易穿過生物膜,、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過程等特點(diǎn),,所以在生化實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用,如可用于開放式細(xì)胞生長,、細(xì)胞的長期觀察,、RNA 或 DNA 提取試劑盒中。其次,,相關(guān)研究表明以 HEPES 溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng),。另外,HEPES 緩沖溶液對鎂生物降解影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明,,HEPES 能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成,。
具體應(yīng)用方面,如鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液(Onivyde),。2022年4月15日,,施維雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺癌治療藥物易安達(dá)(通用名:鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液)獲得中國國家藥品監(jiān)督管理局(NMPA)正式批準(zhǔn),,與5-氟尿嘧啶(5-FU)和亞葉酸(LV)聯(lián)合用于治療接受吉西他濱治療后進(jìn)展的轉(zhuǎn)移性胰腺癌患者,。伊立替康脂質(zhì)體注射液作為一款轉(zhuǎn)移性胰腺癌治療藥物,早前已在全球多個國家和地區(qū)獲批,。更多信息詳見《易安達(dá)(鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液)正式獲批,!制劑處方,發(fā)展歷程及市場前景深度分析》
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