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當(dāng)前位置:艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司>>技術(shù)文章>>注射級(jí)氨丁三醇緩沖液注意事項(xiàng)
注射級(jí)氨丁三醇是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域的緩沖鹽,,全稱三(羥甲基)氨基甲烷,,化學(xué)式C4H11NO3,,白色結(jié)晶顆粒,CAS號(hào):77-86-1,,25°C下的pKa為8.06,,常用于蛋白或核酸緩沖液,有效范圍通常是pH 7.0-9.2之間,。
注射級(jí)氨丁三醇被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長,,注射級(jí)氨丁三醇也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系,,穩(wěn)定電泳過程中的pH,。此外Tris還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物,,注射級(jí)氨丁三醇也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物,。
常見的注射級(jí)氨丁三醇緩沖液有Tris-HCl緩沖液、Tris-磷酸鹽緩沖液以及多種衍生緩沖液,,如TBS,、TE等。
使用Tris緩沖劑的注意事項(xiàng):
1. Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,,△pKa/℃=-0.031 ,,例如:4℃時(shí)緩沖液的pH=8.4,則37℃時(shí)的pH=7.4,,所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃,。
2. Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.1
3. Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng),,包括RNA酶抑制劑,,醛,酶,,DNA以及常見金屬如Cr3+,,F(xiàn)e3+,Ni2+,,Co2+和Cu2+等,,在有些系統(tǒng)中會(huì)起抑制作用,在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用,;
4. Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,,配制的緩沖液要注意蓋嚴(yán)密封;
5. Tris緩沖液對(duì)某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,,需使用與Tris溶液具有兼容性的電極,;
6. Tris緩沖液不適用于二喹啉甲酸(BCA)測定;
7. 吸入,攝入,,皮膚吸收Tris可造成傷害,,操作時(shí)需戴好手套和護(hù)目鏡;
8. 作為蛋白緩沖液時(shí),,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,,則不適宜用Tris,最好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液,。
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