mRNA 是親水的，它可以通過靜電和氫鍵與可電離的陽離子脂質(zhì)相互作用（通常表觀pKa < 6.5）,。這取決于 LNP 內(nèi)部的pH值，如果 LNP 外殼對質(zhì)子具有滲透性——這很可能,，因為 2-(對甲苯胺基)-6-萘磺酸 (TNS) 和勞氏紫等離子化染料可以進入 LNP 核,，那么LNP內(nèi)部的pH值與制劑的其余部分應(yīng)該相似，約為7 到 8,，這意味著大多數(shù)可電離的陽離子脂質(zhì)將不帶電,。

然而，由于可電離的陽離子脂質(zhì)堆積在核中,，它們可能表現(xiàn)出聚電解質(zhì)行為,，導(dǎo)致 Henderson-Hasselbalch 方程的偏差，即滴定曲線的“拖尾"（脂質(zhì)膜內(nèi)的可電離脂質(zhì)的表觀pKa可能與實際值有較大偏差,，這意味著pKa為6.5左右的可電離脂質(zhì)在脂質(zhì)膜內(nèi)的表觀pKa可能與理論值有1~2個pKa單位的偏差,，所以pKa為6.5左右的可電離脂質(zhì)在pH值為7-8之間的脂膜內(nèi)時，依然有可能絕大部分呈現(xiàn)帶正電的狀態(tài),，注：紅色斜體部分是對一些較復(fù)雜概念的進一步解讀,，后同）。此外,，mRNA 和可電離的陽離子脂質(zhì)之間的相互作用可能會影響電離行為,。

對于 siRNA，發(fā)現(xiàn)與可電離陽離子脂質(zhì)存在較弱的靜電相互作用,，這表明至少對于 siRNA-LNP 制劑,，內(nèi)部的pH值接近或等于外部的pH值。對于 mRNA-LNP,，尚未進行此類實驗研究,。mRNA 和陽離子脂質(zhì)復(fù)合的分子動力學(xué)模擬研究證明了脂質(zhì)-脂質(zhì)簇和脂質(zhì)-mRNA 簇的形成,。靜電力和氫鍵都在驅(qū)動陽離子脂質(zhì)和 mRNA 的相互作用。

Arteta 等人的另一個有趣發(fā)現(xiàn)是他們的mRNA-LNP 的外殼是單層的,。其他研究人員根據(jù)冷凍電鏡或 SANS結(jié)果分析提出,，mRNA-LNPs 的外殼由一個或多個雙層組成。這些相互矛盾的發(fā)現(xiàn)表明,，使用這些技術(shù)評估m(xù)RNA-LNP 殼的性質(zhì)是困難的,，可能存在多種類型的mRNA-LNP 結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)取決于脂質(zhì)的性質(zhì)和mRNA-LNP 的制備方法,。反過來,，不同的結(jié)構(gòu)可能會對不同配方的穩(wěn)定性產(chǎn)生影響?？傊?，問題仍然在于目前我們尚不清楚 mRNA-LNP 的結(jié)構(gòu)以及包封的mRNA 與各種脂質(zhì)成分之間的相互作用。

對各種 mRNA疫苗成分的分析表明,，它們具有共同特征,，但也存在差異（表 1）。LNP 配方,、修飾核苷的使用,、高GC含量以及常規(guī) mRNA 和 SAM 疫苗之間的長度差異可能會影響這些 mRNA疫苗在儲存過程中的物理和化學(xué)穩(wěn)定性。

核酸遞送類關(guān)鍵輔料可電離化陽離子脂質(zhì)——DLin-MC3-DMA

| 中文名稱：DLin-MC3-DMA

| 商品名：DLin-MC3-DMA

| 化學(xué)名稱：4-(N,N-二甲基氨基)丁酸（二亞油基）甲酯

(6Z,9Z,28Z,31Z)-heptatriacont-6,9,28,31-tetraene-19-yl 4-(dimethylamino)butanoate

| 分子式：C43H79NO2

| 生產(chǎn)商/manufacturer艾偉拓（上海）醫(yī)藥科技有限公司/ AVT (Shanghai) Pharmaceutical Tech Co,. Ltd.

| CAS號：1224606-06-7

| 用途：陽離子脂質(zhì)體

| 性狀：無色至淡黃色油狀液體

| 純度：98%

| 溶解性：不溶于水,，易溶于DMSO,、甲醇、乙醇,。

| 分子量：642.09

| 保存條件：-20℃

| 注意事項：避免與強酸,、強堿、強氧化性物質(zhì)接觸

| 貨號：002006