液相色譜對于實驗室分析員來說是容易上手的儀器了,,但就算是經驗豐富的分析員都會經常出現(xiàn)錯誤的操作導致液相色譜儀器發(fā)生故障,。而這個時候分析員一般就會選擇把色譜柱進行反沖這個方法,但恒譜生在這里建議分析員在一般情況下還是不要反沖色譜柱,,除非色譜柱有特別說明是可以反沖的,。
那么,哪些柱子不能反向沖洗呢,?其實有兩種,,一種是兩端柱篩板不一樣是不適合的,因為入口的那一端柱篩板的孔徑比較大會導致固體顆粒物質的堵塞,,所以一旦進行反沖就有可能出現(xiàn)造成填料的流失從而導致分析柱的柱效下降的情況,;另一種就是色譜分析柱柱頭塌陷或變型是不宜反沖是,因為柱頭塌陷或變型了會在柱頭上留下縫隙,,從而在反沖的時候會導致柱床移動和填料松動,。
雖然液相色譜柱不應該隨便進行反沖,但如果明確知道來自顆粒物堵塞篩板或柱頭污染時,,反沖色譜柱是一種補救措施,。但反沖前確認柱子是否能夠進行反沖,反沖的時候要注意以下幾點:
1,、在把堵塞在入口那一段端的篩板上的污染物沖出來的同時,,柱頭的填料可能也會被沖出來造成柱效的降低,甚至色譜柱的報廢,。
2,、如果色譜柱出入口篩板孔徑不一致的話,反沖色譜柱就有可能造成填料漏出,,柱效降低等
3,、根據自己用的柱子情況分析到底是什么原因堵塞,,可以用易溶于污染物的溶劑來清洗。目前較多的是緩沖鹽鹽析造成,,可以用大量的水來沖洗,。
4、反沖后要把柱子正過來使用,,盡量避免長期反復正反使用,。
除了反沖,想要延長色譜柱的使用壽命,,可以在分析柱前連接液相保護柱。保護柱安裝在HPLC系統(tǒng)的進樣閥和色譜柱之間,,目的用于保護色譜柱和延長色譜柱使用壽命,。恒譜生液相制備保護柱為色譜柱提供方便、經濟和有效的保護,,延長了液相色譜柱的壽命,,保證分析結果的重現(xiàn)性。隨著使用時間的增加,,高效液相色譜柱分離效能下降,,柱壓增高,其原因主要是由于色譜柱進口段的少量填料被污染引起的,,而色譜柱整個柱床并未被破壞,,使用色譜柱保護柱,相當于在色譜柱前增加了一段額外的填料,,起到了保護整個UPLC色譜柱的作用,。
今天恒譜生分享的知識先到這啦,希望對您的工作有所幫助,!
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