反相色譜柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟(jì)和有效的保護(hù),，延長了色譜柱的壽命,，分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時間的增加,，高效液相色譜柱分離效能下降,，柱壓增高，其原因主要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量填料被污染引起的,，而色譜柱整個柱床并未被破壞,，使用保護(hù)柱,，相當(dāng)于在色譜柱前增加了一段額外的填料，起到了保護(hù)整個色譜柱的作用,。
反相色譜柱特點(diǎn)：
采用高度可控的單分子層形成和封尾技術(shù),；
高的柱間重現(xiàn)性；
高的選擇性和分離效率,；
適合分離酸性,、中性和堿性化合物,，以及許多藥物和多肽等,。
反相色譜柱在使用緩沖液的過程中還要注意以下幾點(diǎn)：
1.避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對鋼質(zhì)有腐蝕作用,；
2.緩沖液要現(xiàn)配現(xiàn)用,，往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液，隔天或放置長時間實(shí)驗(yàn)時會發(fā)生很多怪現(xiàn)象,；
3.使用緩沖液要及時掌握pH范圍,，做到胸中有數(shù)；
4.清洗液路和柱子時,，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗,；
5.長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出，若有白色鹽類析出,，定期用10%硝酸沖洗液路可以避免液路的堵塞,；
6.反相色譜柱選擇緩沖液要用合適的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩,；
過渡流動相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動相相同,，但是不含緩沖鹽的溶液。
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