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鬼筆環(huán)肽染色實驗
一,、實驗介紹
鬼筆環(huán)肽(phalloidin)可特異性與細胞內聚合微絲中的絲狀肌動蛋F-actin結合，通過藕聯(lián)的熒光素分子，從而顯示微絲骨架在細胞中的分布。與抗體相比,，鬼筆環(huán)肽無物種限制，染色特異性及強,，染色區(qū)和未染色區(qū)對比性非常清晰,，而且標記后的肌動蛋白許多生理特性都得以維持。也適用于甲醛固定和去垢劑通透處理后的組織或細胞樣本,。
二,、特點及適用范圍
細胞學、生物學,、病理學教學與科研,。
三、細胞爬片鬼筆環(huán)肽染色實驗步驟
1.在培養(yǎng)板中將已爬好細胞的玻片用PBS浸洗3次,，每次3min,；
2.用4%的多聚甲醛固定爬片15min，PBS浸洗玻片3次,，每次3min,；
3.滴加稀釋好的鬼筆環(huán)肽染液（5μg/mL）,，37℃孵育1 h，PBST清洗3次,，每次3 min,；
4.滴加DAPI避光孵育5min，對標本進行染核,，PBST 5min×4次洗去多余的DAPI,；
5.用吸水紙吸干爬片上的液體，用含抗熒光淬滅劑的封片液封片,，然后在熒光顯微鏡下觀察采集圖像,。
四、實驗結果展示
五,、送樣運輸要求：
按細胞準備流程4%的多聚甲醛固定固定細胞15min后用無菌PBS洗滌后用無菌PBS浸泡,，離心管封口膜封好，4℃冰袋保存運輸?shù)綄嶒炇?/span>
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