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番紅-固綠染色
番紅-固綠染色(軟骨)在涉及關節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學研究中,,常需聯(lián)合使用多種染料以顯示其組織學結構,。其中,,起源于上世紀60年代的番紅O(safranin O)-固綠(fast green)染色因可以直觀反映關節(jié)軟骨、軟骨下骨和骨組織的結構而備受青睞。軟骨呈紅色,,成骨呈綠色,。
技術原理
番紅-固綠(軟骨)染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨和堿性染料番紅O結合呈現(xiàn)紅色,,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結合而成綠色或者藍色,,與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開,。番紅O是一種結合多陰離子的陽離子染料,,其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素)結合。番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關系,,間接反映基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布,。當軟骨收到損傷時,軟骨中的糖蛋白會釋放出來,,使基質(zhì)成分分布不均勻,,從而導致番紅O淡染或不著色。通過圖像分析軟件可以對番紅O染色的軟骨基質(zhì)進行定量分析,。固綠與膠原纖維結合,,不宜褪色。
實驗步驟
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