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番紅-固綠染色
番紅-固綠染色(軟骨)在涉及關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學(xué)研究中,,常需聯(lián)合使用多種染料以顯示其組織學(xué)結(jié)構(gòu),。其中,,起源于上世紀(jì)60年代的番紅O(safranin O)-固綠(fast green)染色因可以直觀反映關(guān)節(jié)軟骨,、軟骨下骨和骨組織的結(jié)構(gòu)而備受青睞,。軟骨呈紅色,,成骨呈綠色。
技術(shù)原理
番紅-固綠(軟骨)染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨和堿性染料番紅O結(jié)合呈現(xiàn)紅色,,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或者藍(lán)色,,與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開,。番紅O是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料,,其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(tuán)(硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素)結(jié)合。番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系,,間接反映基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布,。當(dāng)軟骨收到損傷時(shí),軟骨中的糖蛋白會(huì)釋放出來,,使基質(zhì)成分分布不均勻,,從而導(dǎo)致番紅O淡染或不著色。通過圖像分析軟件可以對番紅O染色的軟骨基質(zhì)進(jìn)行定量分析,。固綠與膠原纖維結(jié)合,,不宜褪色。
實(shí)驗(yàn)步驟
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