一,、儀器的主要用途和特點 XDS-600倒置熒光顯微鏡是由倒置熒光顯微鏡和落射熒光顯微鏡組成。采用優(yōu)良的無限遠光學系統(tǒng),,配置長工作距離平場物鏡與大視野目鏡,。緊湊穩(wěn)定的高剛性主體,充分體現了顯微操作的防振要求,。旋轉擺入擺出式聚光系統(tǒng),,可對高培養(yǎng)皿或圓筒狀燒瓶進行無沾染培養(yǎng)細胞觀察。落射熒光顯微系統(tǒng)采用模塊化設計理念,,可以安全,、快揵地調整照明系統(tǒng),切換熒光濾色片組件,。產品可應用于細胞組織,,透明液態(tài)組織的顯微觀察,也可用于生物制藥,,醫(yī)學檢測,、疾病預防等領域內的熒光顯微術觀察。
XDS-600C電腦型倒置顯微鏡是將精銳的光學顯微鏡技術,、*光電轉換技術,、*的計算機成像技術*地結合在一起而開發(fā)研制成功的一項高科技產品。既可人工觀察顯微圖像,又可以在計算機顯示器上很方便地適時觀察顯微圖像,并可隨時捕捉記錄觀察圖片,從而對觀察圖像進行分析,處理等,還可以保存或打印出高像素圖像照片,。 |
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| 二:高檔倒置熒光顯微鏡儀器的主要技術指標 | 主要規(guī)格: | 1 | 總放大倍數: 100X~400X | 2 | 雙目鏡:雙目觀察 | 3 | 轉換器:五孔轉換器(可選六孔轉換器) | 4 | 目鏡 | 大視野目鏡 10X( Ф 22) | 大視野目鏡 16X( Ф 16) | 5 | 無窮遠長工作距離物鏡 | PLL 10X0.25 工作距離:4.3 mm,,蓋玻片厚度:1.2mm | PLL 20X0.40 工作距離:8.0 mm,蓋玻片厚度:1.2mm | PLL 40X0.65 工作距離:3.5 mm,,蓋玻片厚度:1.2mm | 相襯物鏡 | PLL 10X0.25 PHP2 工作距離:4.3 mm,,蓋玻片厚度:1.2mm | PL L20X/0.40 PHP2 工作距離:8.0 mm | PL L40X/0.60 PHP2 工作距離:3.5 mm | 6 | 長工作距離聚光鏡,工作距離55mm,,帶轉盤式相襯裝置 | 7 | 載物臺 | 固定載物臺尺寸:227mmX208mm | 玻璃圓載物臺板尺寸:Ф118mm | 機械式移動尺寸,,移動范圍:橫向(X) 114mm,縱向(Y) 77mm | 培養(yǎng)皿托板一: 內槽尺寸:86mm(寬)X129.5mm(長),,可適配圓形培養(yǎng)皿Ф87.5mm | 培養(yǎng)皿托板二: 內槽尺寸:34mm(寬)X77.5mm(長),,可適配圓形培養(yǎng)皿Ф68.5mm | 培養(yǎng)皿托板三: 內槽尺寸::57mm(寬)X82mm(長) | 8 | 粗微動同軸調焦,帶鎖緊和限位裝置,微動格值:2μm | 9 | 傾斜45度,瞳距調節(jié)范圍53~75mm. | 10 | 照明系統(tǒng): A.透射照明光源 6V30W 鹵素燈(亮度可調),( 110V 或 220V ) B.落射熒光光源 100W 超高壓直流汞燈,,汞燈電源箱( 110V 或 220V ) | 11 | 激發(fā)濾色片組 | 類型 | 激發(fā)片波長 | 發(fā)射片波長 | 紫外 | 330nm~400nm | 425nm | 紫 | 395nm~415nm | 455nm | 藍 | 420nm~485nm | 515nm | 綠 | 460nm~550nm | 590nm | 12 | 磨砂玻璃,,藍、綠濾色片 | 13 | 防霉 |
| | 三,、系統(tǒng)的組成 | 1,、倒置顯微鏡XDS-600 2、電腦適配鏡 3,、彩色攝像器(CCD) 4,、A/D轉換器(彩色圖象采集設備) 5、計算機(選購) | | | 四,、選購部分 | 1.MiVnt顯微圖像分析軟件 2.330萬像素成像器,610萬像素成像器 3.倒置顯微鏡數碼成像系統(tǒng) | | 五 ,、同類儀器的比較 | 1、XDS-600C倒置顯微鏡 2,、XDS-600D倒置顯微鏡 3,、XDS-500C倒置顯微鏡 4、XDS-500D倒置顯微鏡 |
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(一)熒光顯微鏡的原理和結構特點 熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源,,經過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光(如紫外光3650入或紫藍光4200入)作為激發(fā)光、激發(fā)標本內的熒光物質發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察,。這樣在強烈的對襯背景下,即使熒光很微弱也易辨認,,敏感性高,,主要用于細胞結構和功能以及化學成分等的研究。熒光顯微鏡的基本構造是由普通光學顯微鏡加上一些附件(如熒光光源 ,、激發(fā)濾片,、雙色束分離器和阻斷濾片等)的基礎上組成的,。熒光光源一般采用超高壓汞燈(50一200W),它可發(fā)出各種波長的光,,但每種熒光物質都有一個產生zui強熒光的激發(fā)光波長 ,,所以需加用激發(fā)濾片(一般有紫外、紫色,、藍色和綠色激發(fā)濾片),,僅使一定波長的激發(fā)光透過照射到標本上,而將其他光都吸收掉,。每種物質被激發(fā)光照射后,,在極短時間內發(fā)射出較照射波長更長的可見熒光。熒光具有專一性,,一般都比激發(fā)光弱,,為能觀察到專一的熒光,在物鏡后面需加阻斷(或壓制)濾光片,。它的作用有二:一是吸收和阻擋激發(fā)光進入目鏡,、以免于擾熒光和損傷眼睛,二是選擇并讓特異的熒光透過,,表現出專一的熒光色彩,。兩種濾光片必須選擇配合使用。
熒光顯微鏡就其光路來分有兩種 1.透射式熒光顯微鏡: 激發(fā)光源是通過聚光鏡穿過標本材料來激發(fā)熒光的,。常用暗視野集光器,也可用普通集光器,,調節(jié)反光鏡使激發(fā)光轉射和旁射到標本上.這是比較舊式的熒光顯微鏡,。其優(yōu)點是低倍鏡時熒光強,而缺點是隨放大倍數增加其熒光減弱.所以對觀察較大的標本材料較好,。
2.落射式熒光顯微鏡這是近代發(fā)展起來的新式熒光顯微鏡,,與上不同處是激發(fā)光從物鏡向下落射到標本表面,即用同一物鏡作為照明聚光器和收集熒光的物鏡,。光路中需加上一個雙色束分離器,,它與光鈾呈45。角,,激發(fā)光被反射到物鏡中,,并聚集在樣品上,樣品所產生的熒光以及由物鏡透鏡表面,、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時進入物鏡,,反回到雙色束分離器,使激發(fā)光和熒光分開,,殘余激發(fā)光再被阻斷濾片吸收,。如換用不同的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的組合插塊,,可滿足不同熒光反應產物的需要。此種熒光顯微鏡的優(yōu)點是視野照明均勻,,成像清晰,,放大倍數愈大熒光愈強。
(二)熒光顯微鏡使用方法 1.打開燈源,,超高壓汞燈要預熱幾分鐘才能達到zui亮點,。 2.透射式熒光顯微鏡需在燈源與聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應的阻斷濾片,。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的插塊,。 3.用低倍鏡觀察,根據不同型號熒光顯微鏡的調節(jié)裝置,,調整光源中心,,使其位于整個照明光斑的中央。 4.放置標本片,,調焦后即可觀察,。 使用中應注意:末裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷,;用油鏡觀察標本時,,必須用無熒光的特殊油鏡;高壓汞燈關閉后不能立即重新打開,,需經5分鐘后才能再啟動,,否則會不穩(wěn)定,影響汞燈壽命,。
(三)觀察 在示教臺上的熒光顯微鏡下用藍紫光濾光片,,可見經o.01%的丫啶橙熒光染料染色的細胞,細胞核和細胞質被激發(fā)產生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色),。 |