固紫B鹽 WAKO經(jīng)銷商

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有研究表明,，骨髓基質(zhì)細胞（BMSC）在調(diào)控造血,、組織修復(fù)及一些疑難疾病的治療中具有重要意義。然而BMSC并不具備典型形態(tài)特征,，且骨髓涂片中數(shù)量甚少,，傳統(tǒng)的wright-Giemsa法染色后于普通光鏡下不易識別。應(yīng)用單克隆抗體技術(shù)結(jié)合流式細胞儀,、免疫細胞化學(xué)染色,、熒光標(biāo)記技術(shù)等可將其鑒別，但亦各有其局限性,。

　　為此,，龔旭波等人建立了將固紫B鹽應(yīng)用于BMSC的特異性細胞化學(xué)染色方法。該方法簡便快速,，整個操作過程僅需30 min,，染色明顯，對陳舊標(biāo)本也易著色,，染色液配置后可較長時間保存,，染色結(jié)果保留數(shù)月也不褪色，表明固紫B鹽對BMSC染色具有較高的穩(wěn)定性,、特異性,。

◆實驗步驟

1．標(biāo)本采集

吸取患者骨髓、胸腔積液或腹腔積液50 μL制成涂片,。

2．溶液配制

固定液：95％乙醇溶液34.5 mL,，40％溶液5.5 mL，蒸餾水1 mL混合而成,；

1 g/L固紫B鹽PBS溶液：50 mg固紫B鹽粉末溶于50 mL PBS溶液,，pH 7.2~7.6，4℃下保存,；

蘇木精復(fù)染液：蘇木精2 g溶于250 mL無水乙醇中,，硫酸鋁10 g溶于750 mL蒸餾水中，兩種溶液混合后加熱煮沸

蘇木精復(fù)染液：2 min,，再加入0.5 g碘酸鈉和1 g檸檬酸,，混勻,。

3．固紫B鹽染色

上述新鮮干燥標(biāo)本于固定液固定30 s，小水流沖洗后晾干,，置入1 g/L固紫B鹽PBS溶液（pH 7.2~7.6）,，37℃水浴箱內(nèi)置30 min，流水沖洗1 min,，晾干后蘇木精復(fù)染2 min,，流水沖洗，待干,。鏡下觀察細胞的著色情況及陽性BMSC形態(tài)特征,。

◆染色效果

圖a~d: 骨髓涂片

a~d圖箭頭所示為骨髓基質(zhì)細胞胞質(zhì)染為紫紅色，胞核不著色,，而其他細胞均無此染色特征（固紫B鹽染色x1000）

◆產(chǎn)品列表

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