CAS |
9001-12-1 |
供貨周期 |
現(xiàn)貨 |
貨號 |
C0130 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
Sigma-Aldrich是生命科學(xué)與高科技公司,,其生物化學(xué)與有機化學(xué)產(chǎn)品、試劑盒和服務(wù)被廣泛應(yīng)用于染色體組和蛋白質(zhì)組研究等生命科學(xué)研究,、生物技術(shù),、藥品開發(fā)和疾病診斷以及藥品,、診斷和高科技產(chǎn)品的制造。膠原酶 來源于溶組織梭菌
膠原酶 來源于溶組織梭菌
別名:梭菌肽酶 A
溶解性
TESCA buffer (50 mM TES, 0.36 mM Calcium chloride, pH 7.4): soluble 1-2 mg/mL at 37 °C
一般描述
膠原酶是一種可切割被稱為膠原蛋白的三螺旋蛋白的蛋白酶,。存在有三種類型的組織膠原酶,,而它們都屬于基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)家族。從溶組織梭菌中獲得的膠原酶具有非常強的活性,,因為它可在低至4-10℃的溫度下從兩端對膠原蛋白進行消化,。粗膠原酶混合物含有兩種主要的酶類型,即膠原酶和梭菌蛋白酶,。
應(yīng)用
來自溶組織梭菌的膠原酶在生物學(xué)研究中具有廣泛的用途,,它可用于制備分離的細胞懸浮液。該產(chǎn)品適用于人類腫瘤,、小鼠腎臟,、人類成人和胎兒腦、肺和許多其他上皮組織的解聚,。它還被證明可有效用于肝臟和腎臟灌注研究,、胰腺消化、非實質(zhì)大鼠肝細胞的分離以及肝細胞的制備,。 膠原酶已用于研究晚期糖基化終產(chǎn)物所需的動脈組織的制備,。該酶已經(jīng)測試可以約1 mg/mL的濃度釋放肝細胞,。用于消化的濃度范圍是0.1至5 mg/mL。
生化/生理作用
該膠原酶產(chǎn)物是由溶組織梭菌所分泌的酶混合物組成,,且不同的產(chǎn)物可通過在分泌酶中所發(fā)現(xiàn)的10-18種化合物的比例而進行區(qū)分,。 主要的成分是兩種膠原酶、梭菌蛋白酶和一種中性蛋白酶,。 這些酶的協(xié)同作用可降解膠原蛋白及其他細胞內(nèi)物質(zhì),。膠原酶和中性蛋白酶的作用對于從組織中有效釋放細胞是必需的。 不同類型的膠原蛋白是膠原酶的天然底物,。
每摩爾膠原蛋白酶被4g原子鈣活化,。 它被乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,,β-巰基乙醇,、谷胱甘肽、巰基乙酸和8-羥基喹啉抑制,。
注意
根據(jù)所提供的信息,,該產(chǎn)品在-20°C下可穩(wěn)定保存一年。 在37℃,、50℃和-20℃下FALGPA或蛋白酶的活性在30天內(nèi)不會有損失,。如果進行分裝(10mg / mL)并快速凍存在-20℃,則粗膠原酶的溶液是可以穩(wěn)定的,。進一步的反復(fù)凍融會損壞溶液,。 該產(chǎn)品在置于冰上時可保持100%活性超過7小時。
單位定義
一個膠原蛋白消化單元(CDU)從牛跟腱膠原蛋白中釋放的肽鏈量和1.0 μ亮氨酸,,5小時,,pH7.4,37℃,在鈣離子存在下的茚三酮顏色相同,。一個 FALGPA水解單元每分鐘,,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala,。一個中性蛋白酶單元水解酪蛋白,,產(chǎn)生顏色和1.0 μmole 酪氨酸每5小時,pH7.5,37℃下產(chǎn)生的相同,。一個梭菌蛋白酶單元在DTT存在下,,pH7.6,25℃,每分鐘水解1.0 μmole BAEE,。
制備說明
該產(chǎn)品相當于最初的40%硫酸銨部分 Mandl, I., et al.,J. Clin.Invest., 32, 1323 (1953).溶液通常是在TESCA緩沖液(含有50mM TES,、0.36mM氯化鈣,37℃時pH 7.4)中按1-2 mg/mL進行制備,。
Sigma-Aldrich是生命科學(xué)與高科技公司,,其生物化學(xué)與有機化學(xué)產(chǎn)品,、試劑盒和服務(wù)被廣泛應(yīng)用于染色體組和蛋白質(zhì)組研究等生命科學(xué)研究、生物技術(shù),、藥品開發(fā)和疾病診斷以及藥品,、診斷和高科技產(chǎn)品的制造。
膠原酶 來源于溶組織梭菌