肝素親和柱
肝素（Heparin）親和柱
1. 產(chǎn)品介紹
乳鐵蛋白是近年來國內(nèi)外開發(fā)研究速度最快的一種營養(yǎng)添加劑,，由于其具有廣譜抗菌,、抗病毒感染,、調(diào)節(jié)體內(nèi)鐵平衡,、調(diào)解骨髓細(xì)胞的生成,、抑制人體腫瘤細(xì)胞,、同多種抗生素及抗真菌制劑協(xié)同有效治療疾病等功效，使其產(chǎn)品在國內(nèi)外乳制品加工中的應(yīng)用范圍日益廣泛,。

肝素親和柱能夠特異性的純化樣品中的乳鐵蛋白,，本產(chǎn)品采用了柱狀瓊脂糖凝膠作為固相載體，瓊脂糖凝膠與肝素偶聯(lián)形成免疫吸附劑,，裝柱制成免疫親和柱,，能夠特異性的純化樣品中的乳鐵蛋白，樣品前處理后,，通過免疫親和柱凈化,，乳鐵蛋白特異性吸附在親和柱上，用淋洗液將免疫親合柱上的雜質(zhì)除去,，用洗脫液通過分離柱,，將乳鐵蛋白親和柱上分離下來，最后,，將洗脫液注入HPLC或LC-MS進(jìn)行測定,。

2. 用途
適用于乳、乳粉等食品中乳鐵蛋白含量測定,；樣品中乳鐵蛋白的凈化,，提取等。操作流程
結(jié)合緩沖液：50 mM磷酸鹽緩沖液、pH8.0左右

洗脫緩沖液：50 mM磷酸鹽緩沖液,，2 M NaCl,，pH8.0 左右

（1）樣品處理：

（注：適當(dāng)調(diào)節(jié)樣品稱取量，使樣品中乳鐵蛋白含量應(yīng)控制在3mg以內(nèi),。）

①乳粉：精確稱取 2g樣品,，置于玻璃燒杯中，加入已預(yù)熱至40 ℃左右（不可超過50℃）的結(jié)合緩沖液35 mL ,，用玻璃棒攪拌使其溶解均勻,。將其轉(zhuǎn)移至50 mL 容量瓶中，用少量的結(jié)合緩沖液分次洗滌燒杯和玻璃棒,，洗滌液一并移入容量瓶中,，用結(jié)合緩沖液定容至50ml，混勻,，倒入50 mL離心管中,，在4℃條件下離心（5000r、10min,，棄掉上層油脂,，底層沉淀，取中間層）或微纖維過濾方式去除油脂和雜質(zhì),，準(zhǔn)確吸取10 mL作為樣品液,。

②奶液：稱取適量樣品（以不超過3mg乳鐵蛋白載量為原則，例如：普通牛奶中乳鐵蛋白參考含量小于0.5mg/g,，建議稱量10-20g,、牛初乳中乳鐵蛋白參考含量1-2mg/g，建議稱量2-5g）,，置于50mL容量瓶中,，用結(jié)合緩沖液定容至50ml，混勻,，倒入50 mL離心管中,，在4℃條件下離心（5000r、10min,，棄掉上層油脂,，底層沉淀，取中間層）或微纖維過濾方式去除油脂和雜質(zhì),，準(zhǔn)確吸取10 mL作為樣品液,。

（2）柱子預(yù)處理：取出肝素親和柱,恢復(fù)至室溫（22-25℃），將上端塞子取出,，打開下端堵頭,，將柱內(nèi)保存液流掉至高于凝膠上界面3-5mm處,，加入總體積10ml的結(jié)合緩沖液平衡柱子（柱子不要走干）。

（3）加樣：加入處理好的樣品10ml,，以流速為1-2滴/秒上樣,，直至樣品全部通過親和柱至凝膠上界面（柱子不要走干）。

（4）淋洗：加入10mL結(jié)合緩沖液淋洗柱子,，除去雜質(zhì),，適當(dāng)給一些壓力，調(diào)節(jié)流速為1-2滴/秒,，直至樣品全部通過肝素親和柱,，并排干。

（5）洗脫：加入4ml洗脫緩沖液,，調(diào)節(jié)流速為1-2秒每滴,，緩慢洗脫并排干，收集全部洗脫液,，以洗脫緩沖液定容至4ml,，即為凈化后樣品。

（6）檢測：凈化后樣品用質(zhì)譜,，高效液相,、熒光等方法進(jìn)行檢測。
肝素親和柱