產(chǎn)品名稱(chēng):藍(lán)色瓊脂糖凝膠FF
產(chǎn)品貨號(hào):YXB2780
產(chǎn)品規(guī)格:1ml
儲(chǔ)存條件:詳見(jiàn)標(biāo)簽
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,,不做其他用途,。
藍(lán)色瓊脂糖凝膠FF
藍(lán)色-瓊脂糖凝膠FF
(Blue-Berpharose FF)
1.產(chǎn)品介紹
藍(lán)色-瓊脂糖凝膠FF是一種將活性藍(lán) 3G鍵合在瓊脂糖凝膠微球上形成的生物親和層析分離介質(zhì),。該產(chǎn)品保留了瓊脂糖極好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu),,與生物活性大分子有很好的相容性,,主要用于純化白蛋白,、干擾素、需要核苷酸輔助的酶,、ɑ2-巨球蛋白凝血因子等,。
2.規(guī)格
1ml(預(yù)裝柱)、5ml(預(yù)裝柱),、10ml(預(yù)裝柱),、20ml、100ml,、500ml,、1L 純化流程
應(yīng)用舉例:人血清白蛋白(HSA)的純化
平衡緩沖液:50mM Na2HPO4、50mM 檸檬酸鈉,、pH7.0
結(jié)合緩沖液:50mM Na2HPO4,、50mM 檸檬酸鈉、pH7.0
洗脫緩沖液:50mM Na2HPO4,、50mM 檸檬酸鈉,、1-2M NaCl、pH7.0
(注:結(jié)合液和洗脫液可根據(jù)樣品性質(zhì)進(jìn)行適當(dāng)改變,,原則是低鹽上樣高鹽洗脫)
平衡:用3-5個(gè)柱體積的平衡緩沖溶液進(jìn)行平衡,,觀察檢測(cè)器的變化,直到電導(dǎo)率,、 pH值等參數(shù)不變,。
上樣:樣品的預(yù)處理,樣品需至少用0.45μm濾膜過(guò)濾,,在上樣,,以免堵塞層析柱。上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進(jìn)行選擇,,也可通過(guò)線性實(shí)驗(yàn)找到最佳上樣量,。
淋洗:用5-10個(gè)柱體積的平衡緩沖液進(jìn)行淋洗,觀察檢測(cè)器的變化,,直到電導(dǎo)率,、pH值等參數(shù)基本不變。
(4)洗脫:使用 5-10 倍柱體積的洗脫液,,收集洗脫峰,。
(5)清洗保存:依次使用 3 倍柱體積的平衡緩沖液液和 5 倍柱體積的去離子水平衡填料,然后保存在等體積的20%乙醇中,,置于 4-8 ℃保存,。
5.在位清洗(CIP):
填料可以重復(fù)使用無(wú)需再生,但隨著非特異性結(jié)合的蛋白的增多和蛋白的聚集,,往往造成流速和結(jié)合載量都下降,,這時(shí)可按照下面方法對(duì)樹(shù)脂進(jìn)行清洗。
(1)去除一些沉淀或變性物質(zhì):用 3-4 倍柱體積的0.1M NaOH,,然后用3-4倍柱體積的70%乙醇或2M硫青酸鉀溶液清洗,,然后立即用5倍柱體積的結(jié)合液平衡。
(2)去除一些疏水性吸附造成的非特異性吸附物質(zhì):用 3-4 倍柱體積的70%乙醇或30%的異丙醇或1% Triton X-100 清洗,,然后立即用5倍柱體積的結(jié)合液平衡,。
注意事項(xiàng):
(1)使用時(shí)保證柱子和緩沖液的溫度一致,避免柱床內(nèi)產(chǎn)生氣泡,,影響純化效果,。
(2)本產(chǎn)品保存條件為20%乙醇,4-8℃,。
(3)運(yùn)輸:4-25℃,,常,避光,。
(4)僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,。
藍(lán)色瓊脂糖凝膠FF