牛凝血酶（Thrombin）
牛凝血酶（Thrombin）
來源：牛血漿
性狀：白色或微黃色凍干粉
規(guī)格：1000U/支
保存：凍干粉4-8℃保存2年
純度：SDS-PAGE電泳純度≥95%（無蛋白酶）
比活：≥2000U/mgpr
使用方法：生理鹽水溶解使用,，復溶后-20度凍存，避免反復凍融
用途：凝血酶時間檢測試劑（TT）配制,、纖維蛋白原檢測試劑（FIB）配制,、TB位點酶切、納豆激酶活力測定,、尿激酶活力測定等,非臨床治療使用,。
簡介：凝血酶（Thrombin）來源于牛血漿,，分子量37KD,，是由兩條肽鏈（31KD和6KD）通過二硫鍵組成的,。凝血酶是凝血酶原（凝血因子Ⅱ）激活后形成的蛋白質水解酶，其催化纖維蛋白原（fibrinogen）水解掉A肽和B肽,，由此形成纖維蛋白單體,，單體進一步聚合。
由于凝血酶具有切割序列專一性強,，水解效率高的特點,，它被廣泛地應用于基因工程產品的開發(fā)，其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質的特異性斷裂,，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程,、生物化學、分子生物學等研究,。
凝血酶是一種廣泛用于切割標簽的蛋白酶,，能夠有效切質量比僅為1:2000的蛋白。建議消化緩沖液:20mMTris-HCl緩沖液,，150mM NaCl,，pH8.0，于20℃到37℃之間切割0.3到16小時,1U可切割約0.1-0.5mg蛋白,。
凝血酶最佳切割位點是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',這里X4和X3是疏水氨基酸而X1'和X2'是非酸性氨基酸,，一些經常使用的識別位點L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和M-Y-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之間切割比在4-X3-P-K-L-X2'更有效,。其他識別位點是X2-R[K]-X1',這里X2或者X1'是甘氨酸,，例如A-R-G和G-K-A，這里切割發(fā)生在第二個殘基后,。在凝血酶切割位點和N末端標簽之間插入五個甘氨酸殘基可改善切,，通過這一"甘氨酸連接肽"只需較少酶量就可達到完全切割,而且也可以避免可能發(fā)生的錯誤切割。凝血酶可從切割產物中用p-氨基瓊脂糖親和純化,或者苯甲脒瓊脂糖移去,。
牛凝血酶（Thrombin）