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BUNSEN本生:PCR板封膜正確的貼膜方法
如何給96孔PCR板封膜,確保封板膜與96孔板親密貼合,,防止液體蒸發(fā),才能保障實(shí)驗(yàn)順利。BUNSEN本生小編分享如何正確地封膜?
第1步 將封板膜貼在板子上從自封袋中取出單張封板膜,然后重新封好自封袋,,以保持其中的無酶環(huán)境。如下圖所示,,保持底襯面朝上,,握住封板膜,沿著切線處慢慢撕下底襯,。
隨后,,將封板膜粘性面的一端貼在板子上,掌握好距離和角度,,避免后續(xù)貼歪。貼的過程中一端貼,,另一端拉住,。
注:一定要戴手套
如果使用單端標(biāo)簽的封板膜,則將襯紙部分除去,,然后將封板膜錨固到板上,,使其密封在整個(gè)板上,然后繼續(xù)除去襯紙,。這種方法可以消除封板膜產(chǎn)生的卷曲和回滾,。
如果使用兩個(gè)末端標(biāo)簽的產(chǎn)品,請(qǐng)以連續(xù)平滑的方式剝離中心襯紙,。緩慢剝離內(nèi)襯可以程度地減少卷曲,。注意不要接觸薄膜的粘合表面。
第2步 壓膜
使用壓膜板緩慢刮壓封板膜,,使其全部密封到板上,。假如沒有專用的壓膜板,可以找一個(gè)邊緣光滑的卡,,比如沒有錢的銀行卡或公交卡等,。壓膜步驟應(yīng)至少水平和垂直執(zhí)行兩次,。施加足夠的力(也別太大力)對(duì)于獲得良好的密封性至關(guān)重要。如下圖A和B所示,,水平兩次,,垂直兩次。
將壓膜板沿著孔板的所有外邊緣刮壓至少兩次,,確保施加堅(jiān)定而持續(xù)的壓力,。如上圖C和D所示,孔間和邊緣要都要壓一遍,。為了好結(jié)果,,要耐心。將封板膜正確密封到板上之后,,沿切線撕下接頭部分,。
注:
壓膜的時(shí)候,另一只手要穩(wěn)住板子,,避免板子劇烈晃動(dòng)
第3步 檢查
密封后仔細(xì)檢查平板,,確認(rèn)薄膜與板之間是否緊密貼牢。確認(rèn)每個(gè)孔周圍的粘貼痕跡,,平板的整個(gè)表面(包括周邊)都被密封,,以及膜上是否有液體。封板膜不應(yīng)出現(xiàn)褶皺,,如果觀察到皺紋,,則說明板未正確密封。
注:
注意對(duì)于邊緣凸起的平板,,封板膜在板上定位可能不正確,,要避免膜向上延伸到板的側(cè)壁上在開始PCR實(shí)驗(yàn)前之前將密封的平板放置至少10分鐘,封板膜的粘合力將隨著時(shí)間增加有條件話,,使用孔板專用離心機(jī)離心,。
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