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如何正確提取胎牛血清白蛋白呢?

時間:2022/7/1閱讀:1343
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  如何正確提取胎牛血清白蛋白呢?


  胎牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,,是牛血清中的一種白蛋白,,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430 kDa,,等電點為4.7,。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在western blot中作為Blocking agent;在酶切反應緩沖液中加入BSA,,通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,,對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附,,能減輕有些酶的變性,,能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性,。是胎牛血清中的一種球蛋白,,一般獲取胎牛血清白蛋白,常常運用的方法是加熱法,。

進口血清 (1).png

  下面一起來看看是怎樣獲取胎牛血清白蛋白的!

  一、所需材料

  胎牛血清以檸檬酸三鈉為抗凝劑,,血液搜集后隨即分別出血漿備用,。需要的試劑有血清白蛋白;溴jia酚氯;醋酸纖維素薄膜,別的試劑均為分析純,。獲取胎牛血清白蛋白需要準備 LG-6型大容量冷凍離心機,,DF-C型電泳儀,UV-754型紫外可見分光光度計,,PHS-2型酸度計,。

  二、具體方法

  白蛋白含量測定 選用溴jia酚氯法,,以胎牛血清白蛋白為規(guī)范. 白蛋白純度的測定 選用醋酸纖維素薄膜電泳法,。吸光度值的測定 用分光光度計直接測定蛋白質(zhì)溶液在波長為403 nm處的光吸收值,然后折算成濃度為10 g/L時牛血清白蛋白的光吸收值,,用A403表明,。

  胎牛血清白蛋白的生產(chǎn)工藝 新鮮抗凝牛血用LC-6型大容量離心機(3 000 r/min×30 min)離心分別出血漿,加一定量的蒸餾水稀釋,,再參與恰當?shù)姆€(wěn)定劑和蛋白沉淀劑,,然后按下述方法進行試驗處理:

  1.不一樣pH值溶液對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在其它條件固定的情況下,試驗不一樣pH值對白蛋白的收率,、純度及A403值的影響,。

  2.不一樣加熱保溫時間對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在選定的pH值和其它條件固定的情況下,試驗不一樣加熱保溫時間對白蛋白的收率、純度及A403值的影響,。

  3.不一樣稀釋倍數(shù)對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在選定的pH值和保溫時間及其它條件固定的情況下,,試驗不一樣稀釋倍數(shù)對白蛋白的收率、純度及A403值的影響,。

  4.不一樣加熱溫度對白蛋白的收率和質(zhì)量的影響 在其它條件選定的情況下,,試驗不一樣加熱溫度對白蛋白的收率、純度及A403值的影響,。

  如何正確提取胎牛血清白蛋白呢?本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,,嚴于律己,,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,,是我們的發(fā)展目標,。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,,共創(chuàng)美好的未來,。

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