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注意操作大鼠Elisa試劑盒事項(xiàng)與步驟
大鼠Elisa試劑盒注意事項(xiàng):
1. 大鼠Elisa試劑盒凍結(jié)與寄存:-20℃取出后主張放入2~8℃冰箱中凍結(jié)約,,每隔一段時間悄悄搖晃均勻,,不可直接放入溫度較高處凍結(jié),防止因溫度改變太大,,形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積,,血清的質(zhì)量下降。若短期無法用完一瓶,,主張無菌分裝,再放回冷凍,,防止反復(fù)凍融。4℃長時間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,,形成絮狀物質(zhì)變差,。
2. 大鼠Elisa試劑盒是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培育ES細(xì)胞,,滑潤肌細(xì)胞時)主張滅活,,在培育其余細(xì)胞時不主張滅活血清。血清滅活十分簡單產(chǎn)生沉積,,如必須滅活請按56℃,,30 min,輕微搖晃準(zhǔn)則操作,,滅活溫度高,、時間長、搖晃不均都簡單產(chǎn)生沉積,。
3. 大鼠Elisa試劑盒培育基:無血清培育基在結(jié)果重復(fù)性,、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢,可是,,血清仍然是培育液中最根本的添加物,,尤其是在原代培育或細(xì)胞成長狀況不良時,,常常會先使用有血清的培育液進(jìn)行培育,待細(xì)胞成長旺盛后再換成無血清培育液,。
大鼠Elisa試劑盒操作過程 :
1.用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出,,用無菌絲綢布擦拭潔凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片悄悄放入6孔培育板(每孔一片)或培育皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在間隔紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將通過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培育板中,,使蓋玻片*浸在培育液中;
5.將人Elisa試劑盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,,當(dāng)貼壁細(xì)胞成長至覆蓋培育板底部2/3面積時,將培育板取出,,用蓋片鑷悄悄取出蓋玻片,,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
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