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中級(jí)會(huì)員 | 第7年

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注意操作大鼠Elisa試劑盒事項(xiàng)與步驟

時(shí)間:2021/8/5閱讀:1592
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  注意操作大鼠Elisa試劑盒事項(xiàng)與步驟

  大鼠Elisa試劑盒注意事項(xiàng):

  1. 大鼠Elisa試劑盒凍結(jié)與寄存:-20℃取出后主張放入2~8℃冰箱中凍結(jié)約,,每隔一段時(shí)間悄悄搖晃均勻,,不可直接放入溫度較高處凍結(jié),防止因溫度改變太大,,形成蛋白質(zhì)凝聚而出現(xiàn)沉積,,血清的質(zhì)量下降。若短期無(wú)法用完一瓶,,主張無(wú)菌分裝,再放回冷凍,,防止反復(fù)凍融。4℃長(zhǎng)時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,,形成絮狀物質(zhì)變差,。

  2. 大鼠Elisa試劑盒是否滅活:加熱可滅活血清中補(bǔ)體系統(tǒng),在極少數(shù)情況下(培育ES細(xì)胞,,滑潤(rùn)肌細(xì)胞時(shí))主張滅活,,在培育其余細(xì)胞時(shí)不主張滅活血清。血清滅活十分簡(jiǎn)單產(chǎn)生沉積,,如必須滅活請(qǐng)按56℃,,30 min,輕微搖晃準(zhǔn)則操作,,滅活溫度高,、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都簡(jiǎn)單產(chǎn)生沉積,。

  3. 大鼠Elisa試劑盒培育基:無(wú)血清培育基在結(jié)果重復(fù)性,、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì),可是,,血清仍然是培育液中最根本的添加物,,尤其是在原代培育或細(xì)胞成長(zhǎng)狀況不良時(shí),常常會(huì)先使用有血清的培育液進(jìn)行培育,,待細(xì)胞成長(zhǎng)旺盛后再換成無(wú)血清培育液,。

  大鼠Elisa試劑盒操作過(guò)程 :

  1.用蓋片鑷人Elisa試劑盒將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭潔凈,,不要用紗布;

  2.將蓋玻片悄悄放入6孔培育板(每孔一片)或培育皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

  3.在間隔紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

  4.將通過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培育板中,,使蓋玻片*浸在培育液中;

  5.將人Elisa試劑盒培育板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞成長(zhǎng)至覆蓋培育板底部2/3面積時(shí),,將培育板取出,,用蓋片鑷悄悄取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè),。

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