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同一廠家的色譜柱，比如ODS的,，長(zhǎng)度,，內(nèi)徑，粒度大小都相同,，而出峰的保留時(shí)間,，和峰形不一樣，為什么呢,？
ODS柱是一種常用的反相色譜柱,，也叫C18柱；由于它是長(zhǎng)鏈烷基鍵合相,，有較高的碳含量和較好的疏水性,，對(duì)多種類型的生物大分子有強(qiáng)的適應(yīng)能力，因此在生物化學(xué)分析工作中應(yīng)用廣,。

即便是同一個(gè)生產(chǎn)廠家,，也有很多種不同的生產(chǎn)工藝。這在色譜柱的名字上有標(biāo)識(shí),，比如EclipsePlus C18或者XBridge C18等等,。

不同的工藝會(huì)使得色譜柱的酸堿性、極性,、殘余的硅羥基數(shù)量出現(xiàn)差別,，就會(huì)有不同的選擇性。

雖然AEA,、PEA,、OEA這三個(gè)主峰的出峰和峰型比較接近，但兩個(gè)小雜峰的出峰位置不同,。

如果同樣的色譜條件卻不能實(shí)現(xiàn)色譜分離,，需要重新優(yōu)化色譜條件,。

如果這是一個(gè)雜質(zhì)測(cè)定的實(shí)驗(yàn),，那不同的柱子就會(huì)得到不同的測(cè)定結(jié)果。

所以,，同學(xué)們?nèi)绻麚Q了不同型號(hào)的C18柱,，重新確認(rèn)一下新色譜柱的保留時(shí)間比較好。在使用色譜柱的過(guò)程中,，也需要注意流動(dòng)相的選擇,。
關(guān)于流動(dòng)相的選擇原則是：①樣品易溶，且溶解度盡可能大,。②化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,，不損壞柱子,。③不妨礙檢測(cè)器檢測(cè)，紫外波長(zhǎng)處無(wú)吸收,。④粘度低,，流動(dòng)性好。⑤易于從其中回收樣品,。⑥無(wú)毒或低毒,，易于操作。⑦易于制成高純度,，即色譜純,。⑧廢液易處理，不污染環(huán)境
C18使用指南
1,、新柱在使用前需用純有機(jī)試劑（如甲醇,、乙腈）低流速?zèng)_洗，沖洗體積以×20柱體積為宜,，以便固定相能得到潤(rùn)濕,、碳鏈?zhǔn)嬲梗股V柱的性能達(dá)到狀態(tài),；
2,、使用時(shí)需在每日實(shí)驗(yàn)結(jié)束后沖洗色譜柱，當(dāng)流動(dòng)相中含有酸或鹽時(shí),，需將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈,，通常建議用10%甲醇水沖洗×20柱體積；
3,、長(zhǎng)期保存前要將色譜柱沖洗,，建議沖洗3-4小時(shí)以上，保存在純有機(jī)試劑或高 比例的有機(jī)試劑溶液（如90% 甲醇水）中,；
4,、日常保存溶劑（即需繼續(xù)使用）盡量與3中相同；
5,、由于C18柱（極性改性處理的除外）的固定相疏水性較強(qiáng),，在使用過(guò)程中盡量不要使用高水相條件，若水相比例過(guò)高易引起固定相疏水塌陷,，引起柱效下降,，造成不可逆的負(fù)面影響，（Diamonsil 2）由于碳載量高,，表現(xiàn)尤為明顯,，建議使用過(guò)程中水相比例不多過(guò)90% 
6、色譜柱壓力升高,、柱性能下降：通常為色譜柱被污染,，對(duì)色譜柱進(jìn)行再生處理可恢復(fù)部分柱效,；
7、色譜柱壓力驟升：通常由鹽析出或篩板堵塞引起,，若是鹽析出,，用10%甲醇水低流速?zèng)_洗至壓力恢復(fù)即可；若判斷并非鹽析出,，以純甲醇或10%
甲醇水為流動(dòng)相反沖色譜柱（將色譜柱反接,，不接檢測(cè)器），若反沖半小時(shí)仍無(wú)效果則說(shuō)明反沖無(wú)效,，需尋找其他原因,。