O型口蹄疫免疫抗體檢測試劑盒試劑盒全滴度

使用說明書

產(chǎn)品名稱

通用名：O型口蹄疫免疫抗體檢測試劑盒試劑盒全滴度

包裝規(guī)格

96T×1/盒

檢測原理

    本試劑盒由預(yù)包被口蹄疫O型病毒重組蛋白的酶標(biāo)板,、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬、牛,、羊血清或血漿樣本中口蹄疫O型病毒抗體,。實驗時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本，經(jīng)溫育后若樣品中含有口蹄疫O型病毒抗體,，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后；再加入酶標(biāo)記物,，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合,；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物，在孔中加TMB底物液,，與酶標(biāo)結(jié)合物反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān)；加入終止液終止反應(yīng)后,，產(chǎn)物變?yōu)辄S色,；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有口蹄疫O型病毒抗體,。

試劑盒組成

儲存及有效期

2～8℃保存,，有效期12個月。

包被板開封后請于2～8℃避光保存,，避免受潮,。使用期限為2個月。

適用儀器

含450nm波長的酶標(biāo)儀,，37℃恒溫設(shè)備,，可調(diào)微量移液器,。

樣品準(zhǔn)備

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮,，無溶血、無污染,。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存,，長期需置-20℃保存。

2.根據(jù)樣本數(shù)量準(zhǔn)備對應(yīng)數(shù)量的小刻度EP管或血清稀釋盤,，用樣品稀釋液將待檢血清按50倍稀釋（如4μl血清加入196μl樣品稀釋液中,，混勻）陰性、陽性對照不用稀釋,。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水加1份濃縮洗滌液)。

檢驗方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,，恢復(fù)至室溫,。

2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)陰性,、陽性對照各1孔,，未用的板條盡快密封，2～8℃保存,。

3.陰性,、陽性對照孔分別加入陰性、陽性對照100μl,；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl,。

4.混勻，蓋好蓋板膜,，置37℃溫箱孵育30分鐘,。

5.甩去孔內(nèi)液體，每孔加250ul工作洗滌液,，用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,，重復(fù)洗滌5次，每次洗滌后需拍干液體,。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl,，置37℃避光反應(yīng)30分鐘。

7.甩去孔內(nèi)液體,，每孔加250ul工作洗滌液,，用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去，重復(fù)洗滌5次,，每次洗滌后需拍干液體,。

8.根據(jù)樣本數(shù)量將顯色液A與顯色液B按等體積比例混勻配置為底物工作液,，現(xiàn)配現(xiàn)用。每孔加100ul,，置37℃避光反應(yīng)10分鐘,。

9.每孔加終止液100μl，混勻,，于450nm 測定各孔吸光值（OD值）,，

參考值

實驗正常的情況下，陽性對照OD-陰性對照OD＞0.2,。

檢驗結(jié)果的解釋

1. S/P＝(樣本OD-陰性對照OD)/(陽性對照OD-陰性對照OD),。

2. S/P≥0.4時結(jié)果判讀為陽性。

3. 0.2＜S/P＜0.4時結(jié)果為疑似陽性,；若接種過對應(yīng)疫苗,，則提示抗體水平不足，建議補(bǔ)打疫苗,。

4. S/P＜0.2時結(jié)果判讀為陰性,。

試驗方法的局限性

1. 本試劑盒僅作為定性檢測豬、牛,、羊血清或血漿中口蹄疫O型病毒抗體的粗略評估,。

2. 本試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗,。

注意事項

1.實驗操作時需戴手套,、穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,，各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

2.終止液具有腐蝕性，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗,。

3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋，未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存,。

4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,，使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。

5.洗滌時各孔均需加滿液體,，防止孔口有游離酶不能洗凈,。

6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。

8.不同批號試劑組分不得混用,。

生產(chǎn)企業(yè)

企業(yè)名稱：賽諾利康生物技術(shù)（北京）有限公司

地    址：北京市昌平區(qū)科技園超前路甲1號11號樓7層