豬口蹄疫病毒3ABC蛋白抗體檢測試劑盒

用于檢測豬血清中的豬口蹄疫病毒3ABC非結(jié)構蛋白抗體,，用于區(qū)別臨床野毒感染豬和用滅活疫苗免疫的豬。

需自備的設備及試劑

微量移液器： 0.5μl～10μl,、10μl～100μl,、100μl～1000μl。 一次性移液器吸頭,。 量筒：500ml,。 96孔板酶標儀。 蒸餾水或去離子水,。 洗瓶或洗板機,。

樣品制備

取動物全血，按常規(guī)方法制備血清,，要求血清清亮,，無溶血。

注意事項

試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫，使用前應搖勻,，使用后放回2～8℃,。 不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,，使用試劑時應防止試劑污染,。 底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性，使用時應該注意防護,。 TMB（底物B液）不要暴露于強光和避免接觸氧化劑,。 檢測板拆封后應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中，并盡快置于2～8℃),。 所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染,。 嚴格遵守操作說明可以獲得*的結(jié)果。操作過程中移液,、定時和洗滌等的全部過程必須精確,。 血清稀釋板為一次性用品，不得重復使用,；血清稀釋板的*容量為300μl/孔,。

操作步驟

取預包被的檢測板（根據(jù)樣品*，可拆開分次使用）,，將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中,。同時設陰性、陽性及空白對照各1孔,，取陰性及陽性對照各100μl

分別加入反應孔中,，空白對照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出）,，

蓋上封板膜,，置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜,，甩掉板孔中的溶液,，用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔（約350μl）,，靜置1分鐘后甩掉,。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。 每孔加酶結(jié)合物100μl,，蓋上封板膜,，置37℃溫育30分鐘。 小心揭開封板膜,，甩掉板孔中的溶液,，洗滌3次, 方法同2,。切記*在干凈吸水紙上拍干。 每孔先加底物A液50μl,、再加底物B液50μl,，混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘,。 每孔加終止液50μl,，使反應終止，10分鐘內(nèi)測定結(jié)果,。

結(jié)果判定

以空白對照調(diào)零用酶標儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度A值,。試驗成立的條件是陽性對照孔A450值大于或等于0.4，陰性對照孔A450值必須小于0.1,。如果試驗無效,，試驗中的操作值得懷疑，試驗應重做,，并仔細檢察各組分,。

樣品A450值大于0.15+陰性對照孔均值，判為陽性,；樣品A450值小于0.15+陰性對照孔均值,，判為陰性；如陰性對照孔均值小于0.05按0.05計算,。

有效期

貯存方法： 2 - 8oC下貯存,。

有效期： 12個月。