高致病性豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV-M）核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）

高致病性豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV-M）核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）中含有聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)所需要各種試劑組分，如：引物,、dNTPs,、緩沖液、Taq酶等,，PCR反應(yīng)液混合液中加入檢測樣品,，即可進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳染色判斷，陽性樣本將在相應(yīng)大小的片段處出現(xiàn)特異性條帶,。

規(guī)格： 50T/100T

分類：pcr-熒光試劑盒

儲存條件：-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫,、避光,，快遞免費(fèi)送貨上門。

高致病性豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV-M）核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）產(chǎn)品特點：

◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng),，無非特異性擴(kuò)增,；

◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,，可同時進(jìn)行多個檢測,；

◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

需要注意什么：

PCR反應(yīng)液請在冰中配制,，然后置于PCR反應(yīng)儀上進(jìn)行PCR反應(yīng),。這種冷啟動法（Cool Start Method）與熱啟動法（Hot Start Method）相結(jié)合，更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應(yīng),，增強(qiáng)PCR擴(kuò)增的特異性,，能得到良好的PCR結(jié)果。

PCR的反應(yīng)條件：

因擴(kuò)增片段的大小,、反應(yīng)體積,、使用擴(kuò)增儀器的不同而不同。

◇ 循環(huán)次數(shù)

根據(jù)模板DNA的量以及擴(kuò)增片段的大小,，設(shè)定25～30個循環(huán),。

如果循環(huán)次數(shù)太少，擴(kuò)增量不足,；如果循環(huán)次數(shù)太多,，則會出現(xiàn)Smear。

◇ Anneal以及Extension

合適的Anneal溫度通常在45～68℃之間 (預(yù)備實驗可2℃間隔進(jìn)行),。另外,，由于在60～68℃間，也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進(jìn)行2 Step PCR,。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,，每kbp大體可設(shè)定30秒～1分鐘；當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些,。通常,，Anneal溫度太高，有時會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物,；Anneal溫度太低時,，容易發(fā)生非特異性反應(yīng),。另外，Extension時間太短時,，會得不到擴(kuò)增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成,；而Extension時間太長時，會出現(xiàn)Smear,。