雞毒支原體抗體檢測試劑盒

1 抗原預(yù)包被板條 1塊 7 終止液 6ml

2 酶結(jié)合物 12ml 8 陰性對照 800μl

3 10倍濃縮洗滌液 50ml 9 陽性對照 800μl

4 底物A液 6ml 10 血清稀釋 1塊

5 底物B液 6ml 11 封板膜 2張

6 樣本稀釋液 50ml 12 說明書 1份

 ?雞毒支原體抗體檢測試劑盒

檢測雞血清中的雞毒支原體抗體，用于評估養(yǎng)雞場雞毒支原體疫苗免疫狀況及感染雞的血清學輔助診斷,。

需自備的設(shè)備及試劑

微量移液器： 0.5μl～10μl,、10μl～100μl、100μl～1000μl,。 一次性移液器吸頭,。 量筒：500ml。 96孔板酶標儀。 蒸餾水或去離子水,。 洗瓶或洗板機,。

樣品制備

取動物全血，按常規(guī)方法制備血清,，要求血清清亮,，無溶血。

洗滌液的準備

濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復至室溫,，如有鹽結(jié)晶,，搖動使結(jié)晶的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋,。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右,。

樣品的稀釋

在血清稀釋板中按1：101的體積比稀釋待檢血清（例如：200μl樣品稀釋液中加2μl待檢血清）。

注意：陰性和陽性對照不用稀釋,。取每個樣品后都要更換吸頭，準確記錄每個樣品在板上的位置,。每個樣品在加入到包被板微孔前應(yīng)充分混勻,。

注意事項

?雞毒支原體抗體檢測試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫，使用前應(yīng)搖勻,，使用后放回2～8℃,。 不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,，使用試劑時應(yīng)防止試劑污染,。 底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性，使用時應(yīng)該注意防護,。 TMB（底物B液）不要暴露于強光和避免接觸氧化劑,。 檢測板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中，并盡快置于2～8℃),。 所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染,。 嚴格遵守操作說明可以獲得*的結(jié)果。操作過程中移液,、定時和洗滌等的全部過程必須精確,。 血清稀釋板為一次性用品，不得重復使用,；血清稀釋板的*容量為300μl/孔,。

操作步驟

取預(yù)包被的檢測板（根據(jù)樣品*，可拆開分次使用）,，將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中,。同時設(shè)陰性、陽性及空白對照各1孔,，取陰性及陽性對照各100μl

分別加入反應(yīng)孔中,，空白對照僅加入100μl樣本稀釋液,。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出）。

蓋上封板膜,，置37℃溫育30分鐘,。 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液,，用洗滌液洗3次,。每次用洗滌液注滿板孔（約350μl），靜置1分鐘后甩掉,。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干,。 每孔加酶結(jié)合物100μl，蓋上封板膜,，置37℃溫育30分鐘,。 小心揭開封板膜，甩掉板孔中的溶液,，洗滌3次, 方法同2,。切記*在干凈吸水紙上拍干。 每孔先加底物A液50μl,、再加底物B液50μl,，混勻、蓋上封板膜37℃閉光顯色10分鐘,。 每孔加終止液50μl,，使反應(yīng)終止，10分鐘內(nèi)測定結(jié)果,。

結(jié)果判定

以空白對照調(diào)零用酶標儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度A值,。試驗成立的條件是陽性對照孔A450值大于或等于0.6，陰性對照孔A450值必須小于0.15,。如果試驗無效,，試驗中的操作值得懷疑，試驗應(yīng)重做,，并仔細檢察各組分,。

樣品A450值大于0.25+陰性對照孔均值，判為陽性,；樣品A450值小于0.25+陰性對照孔均值,，判為陰性；如陰性對照孔均值小于0.05按0.05計算,。

有效期

貯存方法： 2 - 8oC下貯存,。

有效期： 12個月。

雞毒支原體（Mycoplasma Galliscepticum,MG）感染是雞呼吸道病的一種，主要引起慢性呼吸道?。?span style="font-family:calibri">Chronicrespiratory disease,CRD）,氣囊炎和竇炎,。隨著養(yǎng)雞規(guī)模加大、飼養(yǎng)方式改變和飼養(yǎng)密度提高,，該病發(fā)病率越來越高,，主要影響雛雞生長、使成年雞產(chǎn)蛋減少,，造成養(yǎng)雞業(yè)經(jīng)濟上的重大損失,，危害性日益突出。

雞毒支原體是支原體目,，支原體科,，支原體屬的一個致病種，主要傳播方式是雞與雞之間的水平接觸傳達室播,，即隨呼吸道分泌物排出,，通過飛沫和塵埃經(jīng)呼吸道感染。另外垂直傳播也是其傳播的主要方式,。有時也發(fā)生間接接觸傳播