雞傳染性法氏囊病毒抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

使用說明書

產(chǎn)品名稱

通用名：雞傳染性法氏囊病毒抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

包裝規(guī)格

96T×1/盒

檢測原理

    本試劑盒由預(yù)包被雞傳染性法氏囊病毒重組蛋白的酶標(biāo)板,、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測雞血清、血漿樣本中雞傳染性法氏囊病毒,。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,，經(jīng)溫育后若樣品中含有雞傳染性法氏囊病毒抗體，則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后,；再加入酶標(biāo)記物，與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合,；再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,，在孔中加TMB底物液，與酶標(biāo)結(jié)合物反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān),；加入終止液終止反應(yīng)后，產(chǎn)物變?yōu)辄S色,；用酶標(biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值，即可知樣品是否含有雞傳染性法氏囊病毒抗體,。

試劑盒組成

2～8℃保存,，有效期12個(gè)月。

包被板開封后請于2～8℃避光保存,，避免受潮,。使用期限為2個(gè)月。

適用儀器

含450nm波長的酶標(biāo)儀,，37℃恒溫設(shè)備,，可調(diào)微量移液器。

樣品準(zhǔn)備

1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,，要求血清清亮,，無溶血、無污染,。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存,，長期需置-20℃保存。

2.用樣品稀釋液將待檢血清按50倍稀釋（如4μl血清加入196μl樣品稀釋液中,，混勻）陰性,、陽性對照不用稀釋。

3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水加1份濃縮洗滌液),。

檢驗(yàn)方法

1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫,。

2.取所需用量酶標(biāo)板條,，設(shè)陰性、陽性對照各1孔，未用的板條盡快密封,，2～8℃保存,。

3.陰性、陽性對照孔分別加入陰性,、陽性對照100μl,；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。

4.混勻,，蓋好蓋板膜,，置37℃溫箱孵育30分鐘。

5.甩去孔內(nèi)液體,，每孔加300ul工作洗滌液,，靜置60秒后棄去，重復(fù)洗滌5次,，每次洗滌后需拍干液體,。

6.每孔加酶標(biāo)記物100μl，置37℃避光反應(yīng)30分鐘,。

7.甩去孔內(nèi)液體,，每孔加350ul工作洗滌液，靜置60秒后棄去,，重復(fù)洗滌5次,，每次洗滌后需拍干液體。

8.每孔依次加底物液A,、底物液B各50μl,，混勻，置37℃避光反應(yīng)10分鐘,。

9.每孔加終止液100μl,，混勻，空白孔調(diào)零后,，于450nm 測定各孔吸光值（OD值）,，

參考值

實(shí)驗(yàn)正常的情況下，陽性對照OD-陰性對照OD＞0.2,。

檢驗(yàn)結(jié)果的解釋

1. S/P＝(樣本OD-陰性對照OD)/(陽性對照OD-陰性對照OD),。

2. S/P≥0.4時(shí)結(jié)果判讀為陽性；0.2＜S/P＜0.4時(shí)結(jié)果考慮疑似感染,；S/P＜0.2時(shí)結(jié)果判讀為陰性,。

試驗(yàn)方法的局限性

1. 本試劑盒僅作為被檢對象是否感染雞傳染性法氏囊病毒的初步評估,具體情況請結(jié)合臨床。

2. 本試劑盒僅供研究使用,，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),。

注意事項(xiàng)

1.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需戴手套、穿工作衣,，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,，各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

2.終止液具有腐蝕性,，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。

3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時(shí)應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,，未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存,。

4.濃縮洗滌液在低溫時(shí)容易結(jié)晶，使用時(shí)需恢復(fù)至室溫以*溶解,。

5.洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,，防止孔口有游離酶不能洗凈。

6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮,。

7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),。

8.不同批號試劑組分不得混用。

生產(chǎn)企業(yè)

企業(yè)名稱：賽諾利康生物技術(shù)（北京）有限公司

地    址：北京市昌平區(qū)科技園超前路甲1號11號樓7層