口蹄疫O型正向間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒

一,、 試驗(yàn)材料

1、 6孔110°微量血凝板,。

2,、 10-100微升可調(diào)微量移液器

3、 塑料咀

4,、 口蹄疫O型正向間接血凝抗原（口蹄疫O型正向血凝診斷液）,，每瓶5毫升，可檢測(cè)血清25-30頭份,。

5,、 陽性對(duì)照血清，每瓶0.5毫升,；陰性對(duì)照血清每瓶0.5毫升

6,、 稀釋液每瓶50毫升

7、 待檢血清每份0.2-0.5毫升（56℃水浴滅活30分鐘）

二,、 操作步驟

1,、 檢測(cè)前，應(yīng)將試劑盒從冰箱中拿出回溫到室溫,，并且將抗原液搖勻,。

2、 稀釋待檢血清：在血凝板上的頭一個(gè)孔――第六孔各加稀釋液50ul,，待檢血清加入第1孔,，混勻后從中取出50ul加入第二孔，依此類推直至第六孔混勻后丟棄50ul,，從第1孔――第六孔的血清稀釋度依次為1：2,、1：4、1：8,、1：16,、1：32、1：64,。

3,、 稀釋陰性血清和陽性血清：在血凝板上的*1排*孔加稀釋液50ul，取陰性血清50ul混勻

后取出50ul丟棄,。此孔即為陰性血清對(duì)照孔,。

在血凝板上的*2排*孔加稀釋液50ul,，第2孔――第7孔各加稀釋液50ul 。吸取陽性血清50ul,，加入*孔混勻并從中取出50ul加入第2孔……直到第7孔混勻并丟棄50ul,。第七孔的陽性血清稀釋度則為1：512，口蹄疫O型正向間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒,。

4,、 在血凝板上的*排第8孔加稀釋液50ul即為稀釋液對(duì)照孔。

5,、 滴加抗原：*排1－8孔和對(duì)照孔各加血凝抗原25ul立即置微量震蕩器上震蕩1分鐘,，或用手

搖勻。室溫下靜置2-3小時(shí)后判斷結(jié)果,，也可于次日判斷結(jié)果,。

口蹄疫O型正向間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒

6、 判定方法和標(biāo)準(zhǔn)：先觀察陰性血清對(duì)照好和稀釋液對(duì)照孔,，紅血球應(yīng)全部沉入孔底,，無凝集現(xiàn)象（－）或呈陽性（+）的輕度凝集為合格；陽性血清對(duì)照應(yīng)呈(+++)凝集為合格,。

在以上3孔對(duì)照合格的情況下,，觀察待檢血清各孔的凝集程度，以呈“++”凝集的待檢血清*稀釋度

為血凝效價(jià)（血凝價(jià)）,。血清的血凝價(jià)達(dá)到1：16為免疫合格,。

“－”表示紅血球100％沉于孔底，*不凝集

“+”表示約有25％的紅血球發(fā)生凝集

“++”表示50％紅血球出現(xiàn)凝集

“+++”表示75％紅血球凝集

“++++”表示90-100％紅血球凝集

7,、 注意事項(xiàng)

（1） 勿用90°或130°血凝板,，以免誤判。

（2） 污染嚴(yán)重或溶血嚴(yán)重的血清樣品不宜檢測(cè),。

（3） 凍干血凝抗原,，必須加稀釋液浸泡7－10天，方可使用,，否則易發(fā)生自凝現(xiàn)象,。

（4） 用過的血凝板，應(yīng)及時(shí)沖洗干凈,，勿用毛刷或其它硬物刷洗板孔,，以免影響孔內(nèi)光潔度。

（5） 使用血凝抗原時(shí),，必須充分搖勻,，瓶底應(yīng)無血球沉積。

（6） 液體血凝抗原4-8℃貯存,，有效期4個(gè)月,。

（7） 如來不及判定結(jié)果或靜置2小時(shí)結(jié)果不清晰,，也可放置第二天判定。

（8） 每次檢測(cè),，只設(shè)陰性,、陽性血清和稀釋液對(duì)照各1孔。

（9） 稀釋不同的試驗(yàn)要素時(shí),，必須更換塑料咀,。

（10） 血凝板洗凈后，自然干燥,，可重復(fù)使用,。