TTC染色液是TTC和活細(xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶反應(yīng),,生成紅色的甲臜,,用來(lái)表示細(xì)胞的活力。配制多為2%,,染色要避光,,37度條件下,,它是評(píng)價(jià)腦缺血損傷常用的指標(biāo)。
TTC染色液技術(shù)指標(biāo):
1 原理:TTC(2,,3,,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感復(fù)合物,1894年*合成用來(lái)檢測(cè)種子的生存能力,,1958年開(kāi)始用來(lái)染色檢測(cè)哺乳動(dòng)物組織的缺血梗塞,。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結(jié)構(gòu)酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,與正常組織中的脫氫酶反應(yīng)而呈紅色,,而缺血組織內(nèi)脫氫酶活性下降,,不能反應(yīng),故不會(huì)產(chǎn)生變化呈蒼白,。
2 取腦:可麻醉后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦,。因?yàn)槟X組織未用多聚甲醛固定,所以較軟,,取腦時(shí)更應(yīng)仔細(xì),,保持大腦的完整性。
3 -20度冰箱中速凍20分鐘左右,,便于切片,。
4 切片:一般切成5-6片,每隔2mm切一片,。一刀在腦前極與視交叉連線中點(diǎn)處,;第二刀在視交叉部位;第三刀在漏斗柄部位,;第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間,。(參考:張均田,主編.現(xiàn)代藥理試驗(yàn)方法),。如果需計(jì)算面積的話,,應(yīng)切得均勻或用專門(mén)的腦槽。
5 將切片置于TTC中,,常規(guī)濃度為2%,,也有用1%或更低濃度的。
6 用錫箔紙蓋住后,,放入37C溫箱15~30min,,不時(shí)翻動(dòng)腦片,使均勻接觸到染色液,。也可以用將腦片放入多孔板,,再滴入TTC,覆以圓形蓋玻片使均勻染色,。
7 染色后效果:為皮層下梗死,。
毓秀生物科技(上海)有限公司是一家專注于生物科技前沿技術(shù)研發(fā)和科研技術(shù)服務(wù)的公司,,公司建有專業(yè)的分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、組織病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室,,為眾多生物醫(yī)藥企業(yè)、科研機(jī)構(gòu),、醫(yī)院及高校提供分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)、病理形態(tài)學(xué)等方面科研服務(wù),。公司核心團(tuán)隊(duì)曾在國(guó)內(nèi)外許多優(yōu)秀學(xué)府從事過(guò)多年研發(fā)工作,,秉承“為客戶創(chuàng)造價(jià)值,為員工實(shí)現(xiàn)夢(mèng)想,,為社會(huì)創(chuàng)造財(cái)富"的經(jīng)營(yíng)理念,,堅(jiān)持以技術(shù)創(chuàng)新為先導(dǎo),以服務(wù)質(zhì)量為根本,,為中國(guó)生物醫(yī)藥和科學(xué)研究提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),。