外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)是包含核酸和蛋白質(zhì)的小囊泡(30-200 nm),是由各種各樣的細(xì)胞分泌產(chǎn)生,,在血液,、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在,。本產(chǎn)品是自主開(kāi)發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,,經(jīng)過(guò)優(yōu)化處理適用于細(xì)胞培養(yǎng)上清液,、血清、血漿,、尿液和其他體液(腦脊液,、腹水、羊水,、乳液以及唾液等)中的外泌體提取,,并搭配純化過(guò)濾裝置,可快速高效獲得高純度的外泌體顆粒,。
測(cè)量外泌體的粒徑分布一直以來(lái)都是外泌體表征的重要組成部分,。但是由于外泌體的尺寸僅為30~200 nm,所以必須借助一些特殊的檢測(cè)手段才能夠?qū)@種在光學(xué)顯微鏡下不可視的顆粒進(jìn)行觀測(cè),。本篇就外泌體粒徑測(cè)量技術(shù)的發(fā)展進(jìn)行簡(jiǎn)述,,并對(duì)不同技術(shù)的差異進(jìn)行比較。在外泌體發(fā)現(xiàn)的早期,,由于還沒(méi)有專門(mén)針對(duì)這類(lèi)尺寸顆粒的分析方法,,因此直接在電鏡下面觀察粒徑并統(tǒng)計(jì)成為了最早的外泌體粒徑統(tǒng)計(jì)方法。但是這種方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力,,且通量低,,在面對(duì)臨床和科研中的大量樣本時(shí)顯得十分無(wú)力。
由于外泌體與材料學(xué)所合成的脂質(zhì)體在形態(tài)上十分相似,,因此用于脂質(zhì)體表征的動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)(DLS)便被應(yīng)用于外泌體的尺寸測(cè)量上,。DLS利用光射到遠(yuǎn)小于其波長(zhǎng)的小顆粒上時(shí)會(huì)產(chǎn)生瑞利散射現(xiàn)象,通過(guò)觀察散射光的強(qiáng)度隨時(shí)間的變化推算出溶液中顆粒的大小,。但是這種技術(shù)會(huì)受到測(cè)量物質(zhì)的顏色,、電性、磁性等理化特性的影響,,并且對(duì)于灰塵和雜質(zhì)十分敏感,。因此使得DLS在測(cè)量尺寸較小的粒子時(shí),,測(cè)量出的粒徑與實(shí)際的分布具有較大的偏差,。
為了彌補(bǔ)DLS的短板,納米粒子跟蹤分析(外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù))技術(shù)孕育而生,。這種技術(shù)采用激光散射顯微成像技術(shù),,用于記錄納米粒子在溶液中的布朗運(yùn)動(dòng)軌跡,并通過(guò)Stokes-Einstein方程推算粒子大小,。這種技術(shù)能夠?qū)?0~1000 nm的粒徑進(jìn)行測(cè)量,,因此能夠提供更為精確的粒徑數(shù)據(jù)。在諸多文獻(xiàn)的測(cè)試中均取得了較DLS更好的精度,,因此成為目前最為主流的外泌體尺寸測(cè)量手段,。
外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)技術(shù)的工作原理與DLS技術(shù)在測(cè)量不同尺寸納米球的數(shù)據(jù)對(duì)比。可見(jiàn)相比于DLS,,外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)測(cè)量的粒徑分布更為精確,。
雖然外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)取得了比DLS 更高的精準(zhǔn)性,但是隨著外泌體研究的深入,,其局限性也十分明顯,。首先外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)僅能夠測(cè)量溶液中顆粒的平均粒徑尺寸,但是外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)無(wú)法分辨其中的外泌體,、囊泡,、脂蛋白,也不能區(qū)別不同源性的外泌體,。這直接限制了外泌體粒徑表征的意義,,使得研究者很難探究外泌體尺寸與外泌體來(lái)源之間的關(guān)系。另外外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)本身對(duì)于測(cè)試時(shí)的溫度,、濃度和校準(zhǔn)都有著較高要求,,因此使得外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)在測(cè)試較小的粒子時(shí)其精度仍不能達(dá)到令人滿意的效果,其測(cè)試結(jié)果卻仍與電鏡,、AFM等成像技術(shù)所觀測(cè)到的粒徑存在著明顯差異,。外泌體在TEM下的成像及粒徑統(tǒng)計(jì)與外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)測(cè)量的結(jié)果對(duì)比??梢?jiàn)外泌體粒徑檢測(cè)服務(wù)測(cè)量到的粒徑要比TEM直接測(cè)量的結(jié)果大50~100,。
表征測(cè)試是外泌體研究的重要一環(huán),特別是針對(duì)分離提取后的外泌體進(jìn)行濃度檢測(cè)和粒徑分布檢測(cè),,對(duì)于后續(xù)的功能和進(jìn)一步分析是*的步驟,。表觀生物提供基于Nanosight儀器定量檢測(cè)外泌體粒徑和濃度,方便,、快捷,、精準(zhǔn),助您深入探索外泌體的神秘世界,!
儀器利用激光光源照射納米顆粒懸浮液,,利用全黑背景則功能強(qiáng)信號(hào),可以清晰觀察到帶有散射光的顆粒的布朗運(yùn)動(dòng),。對(duì)于寬分布體系,,NTA軟件可以同時(shí)對(duì)于每一個(gè)顆粒進(jìn)行直接觀測(cè),進(jìn)行自動(dòng)跟蹤,,進(jìn)行粒徑計(jì)算,,并且同時(shí)得到整個(gè)體系的粒徑分布信息。結(jié)合顆粒的散射強(qiáng)度,,可以繪制出粒徑,,對(duì)應(yīng)數(shù)量分布強(qiáng)度和散射強(qiáng)度的三維圖譜,,可以對(duì)于粒徑相同但是材質(zhì)不同的樣品作出清晰區(qū)分??梢员4骖w粒運(yùn)動(dòng)的錄像和圖片信息,,用于將來(lái)做進(jìn)一步分析。
2,、送樣時(shí),,樣品須一直處于低溫環(huán)境中(推薦干冰寄送;短時(shí)間內(nèi)可以采用藍(lán)冰條件下運(yùn)輸),;
3,、送樣前須告知溶劑的具體情況;可使用的溶劑,,默認(rèn)為水,,其他非腐蝕性溶劑也行;但折射率需與水接近(1.3-1.5),,如油不可作為溶劑
毓秀生物科技(上海)有限公司是一家專注于生物科技前沿技術(shù)研發(fā)和科研技術(shù)服務(wù)的公司,,公司建有專業(yè)的分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)、組織病理學(xué)實(shí)驗(yàn)室,,為眾多生物醫(yī)藥企業(yè),、科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)院及高校提供分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué),、病理形態(tài)學(xué)等方面科研服務(wù)。公司核心團(tuán)隊(duì)曾在國(guó)內(nèi)外許多優(yōu)秀學(xué)府從事過(guò)多年研發(fā)工作,,秉承“為客戶創(chuàng)造價(jià)值,,為員工實(shí)現(xiàn)夢(mèng)想,為社會(huì)創(chuàng)造財(cái)富"的經(jīng)營(yíng)理念,,堅(jiān)持以技術(shù)創(chuàng)新為先導(dǎo),,以服務(wù)質(zhì)量為根本,,為中國(guó)生物醫(yī)藥和科學(xué)研究提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),。