穩(wěn)定細(xì)胞株技術(shù)原理:
慢病毒幾乎可以感染所有種類(lèi)的細(xì)胞,,并且在感染后可以整合到受感染細(xì)胞的基因組,,進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定表達(dá)。利用慢病毒的特性,,將外源DNA克隆到具有某種抗性的慢病毒載體中并感染宿主細(xì)胞,,利用載體中所含的抗性標(biāo)志進(jìn)行篩選,可得到穩(wěn)定表達(dá)或沉默特定基因的細(xì)胞株,。
可選細(xì)胞:干細(xì)胞,、腫瘤細(xì)胞,、其它種類(lèi)細(xì)胞株。
穩(wěn)定細(xì)胞株服務(wù)流程:
一,、過(guò)表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建
過(guò)表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)株是利用慢病毒介導(dǎo)的方式,,病毒感染細(xì)胞后能整合到宿主細(xì)胞的基因組并穩(wěn)定遺傳,適合在各類(lèi)細(xì)胞中穩(wěn)定過(guò)量表達(dá)不同大小的外源基因,。
過(guò)表達(dá)細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)包括目的基因過(guò)表達(dá)慢病毒載體構(gòu)建,、病毒包裝、細(xì)胞轉(zhuǎn)染和篩選,。您只需提供目的基因和需要構(gòu)建的細(xì)胞系,,我們將按照您的要求完成目的基因過(guò)表達(dá)細(xì)胞株的構(gòu)建和檢測(cè),為您提供高質(zhì)量的基因過(guò)表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,。
二,、干擾穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建
shRNA干擾提供了一種經(jīng)濟(jì)、快捷,、高效的抑制特異基因表達(dá)的技術(shù)手段,,有助于研究該基因在生物模型系統(tǒng)中的作用,是研究基因功能的重要工具,,并且逐步成為病毒性疾病,、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段。
與化學(xué)合成siRNA和基于瞬時(shí)表達(dá)載體構(gòu)建的shRNA相比,,lentivirus-shRNA克隆經(jīng)過(guò)慢病毒包裝后,,可有效感染一些難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系如原代細(xì)胞,懸浮細(xì)胞和處于非分裂狀態(tài)的細(xì)胞,,并且在感染后可以整合到宿主細(xì)胞的基因組,,進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的穩(wěn)定表達(dá)。
備注:可根據(jù)客戶(hù)需求選擇不同的熒光和抗性,。