| 一,、細胞基本屬性 | ||||
| 細胞名稱 | U2932人B淋巴細胞瘤細胞（STR鑒定正確） | |||
| 細胞別稱 | U-2932；U2932,；人B淋巴細胞瘤細胞（STR鑒定正確） | |||
| 種屬來源 | 人 | |||
| 年齡性別 | 女,；29歲 | |||
| 組織來源 | B細胞 | |||
| 生長特性 | 懸浮生長 | |||
| 細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣 | |||
| 細胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | |||
| 背景介紹 | 1996年從一名患有彌漫性大B細胞淋巴瘤的29歲女性腹水中建立，世衛(wèi)組織16年前被診斷為晚期霍奇金淋巴瘤,，并復(fù)發(fā)數(shù)年在多次和放療方案完成緩解后的時間,；細胞被描述文獻中BCL2、BCL6和p53過度表達,；屬于ABC樣淋巴瘤亞型（活化B細胞）,。 | |||
| STR位點 | Amelogenin X：CSF1PO：10,12；D2S1338：22,23,；D3S1358：15,16,；D5S818：12；D7S820：9,13,；D8S1179：13,14,；D13S317：11；D16S539：12,；D18S51：15,；D19S433：14；D21S11：28,29,30,；FGA：22,24,；Penta D：12；Penta E：13,14,；TH01：9.3,；TPOX：11,12,；vWA：14,17 | |||
| 生物安全等級 | 1 | |||
| 細胞規(guī)格 | 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 | |||
| 支原體檢測 | 無 | |||
| 保藏機構(gòu) | DMSZ ACC-633 | |||
| 培養(yǎng)基 | RPMI-1640+10%FBS+1%PS | |||
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ | |||
| 凍存條件 | 無血清凍存液,，液氮儲存 | |||
| 生物安全等級 | 1 | |||
| 細胞貨期 | 現(xiàn)貨,，1周左右 | |||
| 運輸方式 | 復(fù)蘇發(fā)貨（T25瓶免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 | |||
| 供應(yīng)限制 | 于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 | |||
| 特別說明 | 以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 | |||
| 二,、細胞培養(yǎng)操作 | ||||
| 收貨方式 | T25瓶 | 凍存管 | ||
| 收貨處理 | 觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁,，將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置4-6h,，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài) | 收到細胞后，需立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇 | ||
| 傳代密度 | 細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng) | 第二天換液并檢查細胞密度 | ||
| 傳代比例 | 傳代建議1：2傳代,，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 | 一管細胞建議接種到6cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 | ||
| 傳代方法 | 方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心3-5min分鐘,，棄去上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:4的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液,，加1-2 mL培養(yǎng)基后輕輕吹勻,。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。 | ||
| 注意事項 | 懸浮細胞收貨注意事項： 1,、收貨時需鏡下拍照（看密度,、狀態(tài)） 2、靜置后需鏡下拍照（看整體密度） a.如密度50%以下,，建議換液并豎瓶培養(yǎng) b.如密度50%-80%,，建議換液培養(yǎng)，隔天觀察密度 c.如密度90%，建議傳代 3,、換液及傳代處理前,，培養(yǎng)瓶豎著放置至少半小時（使細胞沉到瓶底）；收集上清,，必須將瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基（70ml）全部收集,！并用PBS（10ml）潤洗瓶底并收集！離心轉(zhuǎn)速為1000rpm,，5min,。 4.運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 5.因運輸問題,，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。 | 1.收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,，檢查凍存管是否融化,，若已融化需直接離心細胞接種觀察，若未融化可以將細胞按正常步驟保存,； 2.為保證細胞的高存活率,，收到產(chǎn)品后，請立即解凍復(fù)蘇細胞,。 | ||
| 到貨須知 | 1.收到細胞后,，首先觀察并拍照記錄細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否揮發(fā)，細胞是否解凍,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。 2.靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照（當天以及第 2,3 天請拍照），記錄細胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),；建議細胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài),。 3.由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決,。 4.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息,，如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基、血清比例,、所需細胞因子等,，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,，責(zé)任由客戶自行承擔(dān),。 | |||
| 備注：客戶在細胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話： 按 2,，我們隨時給予解答,。 | ||||
| 三、細胞凍存操作 | ||||
| 凍存液配方 | 無血清凍存液,，液氮儲存 | |||
| 細胞密度 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例 | |||
| 凍存方法 | a,、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min,，棄去上清液,，用PBS清洗一遍，棄盡PBS,，進行細胞計數(shù),。 b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,，使細胞密度5x106~1x107/mL,，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液,，注意凍存管做好標識,。 c、將凍存管放入-80℃冰箱,，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | |||
| 注意事項 | 凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,，若有異常,，及時調(diào)整實驗方案 | |||
| 四,、售后服務(wù) | ||||
| 重發(fā)標準 | 1.細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失,、瓶身破損,、培養(yǎng)液嚴重漏液等，重發(fā),； 2.收到細胞未開封,，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā),； 3.收到細胞3天內(nèi),，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后,，重發(fā),； 4.常溫發(fā)貨的細胞靜置 2 小時后，干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后,，絕大多數(shù)細胞未存活,，經(jīng)核實后，重發(fā),； 5.常溫發(fā)貨的細胞靜置 22 小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇 2 天后,，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后,，重發(fā)； 6.細胞活性問題,，請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，經(jīng)核實后,，重發(fā),； 7.視具體情況而定。 | |||
| 不予重發(fā) | 1.客戶操作造成細胞污染,，不重發(fā),； 2.客戶嚴重操作失誤致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā),； 3.非我們推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā)； 4.細胞狀態(tài)不好,，未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細胞狀態(tài)照片,，不重發(fā)； 5.細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題的,，不重發(fā),； 6.收到細胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)； 7.視具體情況而定,。 | |||
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