一,、細(xì)胞特性

1. 細(xì)胞名稱(chēng)：NFS-60細(xì)胞
2. 形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣,，懸浮生長(zhǎng)
3. 含量：>1x10⁶ 個(gè)/瓶
4. 污染：支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5. 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

二,、細(xì)胞接收后的處理：
1、貼壁細(xì)胞

1. 收到T25方瓶細(xì)胞后,，請(qǐng)檢查是否漏液,，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們（凍存管細(xì)胞收到后直接37℃水浴復(fù)蘇或直接放置于液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存）,。
2. 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3. 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,，換用新鮮的*培養(yǎng)基,。
4. 如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代。
5. 接到細(xì)胞次日,，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系,。

2,、懸浮細(xì)胞

1. 收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液,，如果漏液,，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2. 請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),，去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3. 1200rpm離心5min，棄去15ml離心管中的培養(yǎng)基,，細(xì)胞沉淀用新鮮的*培養(yǎng)基重懸并培養(yǎng),。
4. 如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,。
5. 接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉寐?lián)系。

                      
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,，供參考
一,、NFS-60細(xì)胞培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1. 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%；15ng/mL G-CSF,；1% P/S,。
2. 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3. 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲(chǔ)存。

二,、細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

   對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化,。
3. 輕輕吹打后吸出,，移入15ml離心管中,，在1200RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行,，后的重懸液使用血清,。懸浮細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后離心，用血清重懸浮,，加DMSO至終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X10⁶個(gè)細(xì)胞凍存,。

注意事項(xiàng)：
1. 收到凍存管細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系,。
2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù),，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。
3. 細(xì)胞用途：僅供科研使用。

發(fā)貨方式：
復(fù)蘇后發(fā)貨：我們復(fù)蘇細(xì)胞后發(fā)貨,，貨期一周左右,，免運(yùn)費(fèi)。（氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨）
凍存發(fā)貨(干冰運(yùn)輸）：需額外增加干冰運(yùn)費(fèi),，選擇干冰運(yùn)輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細(xì)胞,，為了保證客戶(hù)接種可靠性多發(fā)一管。（氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨）
細(xì)胞發(fā)貨采取專(zhuān)業(yè)的運(yùn)輸包裝,，并選擇快捷的運(yùn)輸方式（順豐速運(yùn)或其他空運(yùn)快遞）
本公司細(xì)胞引種來(lái)源：ATCC,、DSMZ,、ECACC、武大細(xì)胞庫(kù),、上海生化細(xì)胞所,、中國(guó)科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會(huì)等。

公司簡(jiǎn)介：
    無(wú)錫欣潤(rùn)生物科技有限公司是一家致力于為藥物公司,、衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)和科研院所提供符合GLP標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的細(xì)胞系,、原代細(xì)胞及體外藥物代謝和藥物間相互作用評(píng)價(jià)的產(chǎn)品公司，并提供以原代細(xì)胞為中心的體外藥物篩選相關(guān)技術(shù)服務(wù)的生物高科技企業(yè),。
    公司擁有多項(xiàng)*成熟的原代細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù),，其中肝臟類(lèi)細(xì)胞、成年鼠心肌細(xì)胞,、血管內(nèi)皮細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞、胰島細(xì)胞,、小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,、肝S9和肝微粒體等特色產(chǎn)品及相關(guān)服務(wù)獲得眾多合作伙伴的*。
    公司始終以“專(zhuān)注產(chǎn)品,，用心服務(wù)”為核心價(jià)值,，致力于打造原代細(xì)胞分離培養(yǎng)品牌，為各類(lèi)藥物研發(fā)機(jī)構(gòu)提供細(xì)胞生物學(xué)方面的高質(zhì)量產(chǎn)品和優(yōu)質(zhì)服務(wù),。