細(xì)胞接受后的處理：
1）收到細(xì)胞后,，請檢查是否漏液,，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們,。
2）請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),，去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養(yǎng)約2-3h,。
3）離心棄去15ml離心管中的培養(yǎng)基,，細(xì)胞沉淀用新鮮的*培養(yǎng)基重懸并培養(yǎng),。
4）如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進行細(xì)胞傳代。
5）接到細(xì)胞次日,，請檢查細(xì)胞是否污染,，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

• 1. 收到細(xì)胞后,，請檢查是否漏液,，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們,。
  2. 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),，去掉封口膜并將15ml離心管置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3. 離心棄去15ml離心管中的培養(yǎng)基,，細(xì)胞沉淀用新鮮的*培養(yǎng)基重懸并培養(yǎng)。
  4. 如果細(xì)胞長滿（90%以上）請及時進行細(xì)胞傳代,。
  5. 接到細(xì)胞次日,，請檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系,。

 

細(xì)胞用途：僅供科研使用。

                      

本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,，供參考

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1. 準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,。
2. 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3. 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。液氮儲存。
   • 細(xì)胞處理：
4. 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
5. 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
6.  

1.      將培養(yǎng)瓶中細(xì)胞輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中,，在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液。

2.      根據(jù)細(xì)胞的生長狀態(tài),，按1:2或以上比例用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，將合適量培養(yǎng)液移入到T-25培養(yǎng)瓶中或T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細(xì)胞凍存,。懸浮細(xì)胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X10⁶個細(xì)胞凍存,。

 

注意事項：

1. 收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系,。

2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。