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在單克隆抗體的制備過程中,，及時凍存原始孔的雜交瘤細(xì)胞以及克隆化得到的亞克隆細(xì)胞是十分重要的,。因為在沒有建立一個穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時候,，細(xì)胞的培養(yǎng)過程中隨時可能發(fā)生細(xì)胞的污染、細(xì)胞突變、分泌抗體能力的喪失等等。如果沒有原始細(xì)胞的凍存,，則可能因上述意外而前功盡棄。 因此,，雜交瘤細(xì)胞的凍存在單克隆抗體制備過程中起著關(guān)鍵性作用,。
目前，雜交瘤細(xì)胞的凍存方法同其他細(xì)胞系的凍存方法是一樣的,。
傳統(tǒng)雜交瘤細(xì)胞的凍存：
傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液的組分：培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合，或90%的血清+10% DMSO
傳統(tǒng)雜交瘤細(xì)胞凍存方法：
1. 初篩,、復(fù)篩驗證陽性的每個單克隆細(xì)胞轉(zhuǎn)種3個48孔板的培養(yǎng)孔,，培養(yǎng)至匯合度達(dá)90%；
2. 吸去培養(yǎng)基,，加入傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液（需現(xiàn)用現(xiàn)配）重懸細(xì)胞,，調(diào)整濃度至1x106/ml，然后將這3個48孔板的培養(yǎng)孔細(xì)胞凍存懸液合并至一支細(xì)胞凍存管中,；
3. 程序降溫方法凍存,，先將凍存管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時（或隔夜）,，后才移至液氮罐中進(jìn)行長期的儲存。
（其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,，以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量的死亡。）
傳統(tǒng)雜交瘤細(xì)胞凍存面臨的困難：
1. 需現(xiàn)配凍存液,，步驟繁瑣,；
2. 因不能孔板原位凍存，且不能微量凍存,，所以需將3孔細(xì)胞合并一管凍存管凍存,，步驟繁瑣；
3. 需要程序降溫（4℃→-20℃→-80℃→液氮）,，步驟繁瑣,；
4. 含血清，細(xì)胞污染(病毒,、霉菌和支原體等)的風(fēng)險更高,；
5. 血清批次、品質(zhì)間差異導(dǎo)致凍存液的批次間差異,；
6. 只能液氮凍存,，不能-80℃冰箱凍存。
Cellregen無血清細(xì)胞凍存液，是一款可用于雜交瘤細(xì)胞凍存的凍存液,，成分明確,，含DMSO、糖類,、氨基酸等成分,，不含血清和動物源成分的通用型凍存液。
可取4mL無血清細(xì)胞凍存液試用裝
申領(lǐng)活動日期：2019.11.18-2019.12.31
Cellregen無血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的方法：
1. 驗證陽性克隆的細(xì)胞培養(yǎng)孔,，將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈,；
2. 加入適量Cellregen無血清細(xì)胞凍存液，充分浸潤細(xì)胞（無需消化細(xì)胞）,；
3. 蓋上蓋板,，直接放入-80℃冰箱，長期冷凍保存,。
可見,，Cellregen無血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)勢：簡單、方便,、快捷
1. 即用型,，無需現(xiàn)配，可直接使用
2. 可孔板原位凍存,，可微量凍存,，無需使用凍存管
3. 無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存,，操作簡單
4. 不含血清,，大大減少細(xì)胞污染
5. 因不含血清，批次間差異小
6. 無需液氮,，-80℃冰箱長期凍存
