化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
ICP-MS快速分析葡萄酒中的砷形態(tài)
閱讀：474 發(fā)布時(shí)間：2024-8-27砷 (As) 天然存在于環(huán)境中,，但人類活動(dòng)也會(huì)造成某些地區(qū)的砷含量增加,。 人為砷來源包括采礦、冶煉和發(fā)電等工業(yè)過程,，以及農(nóng)業(yè)農(nóng)藥和木材防腐 劑等[1],。一旦發(fā)生砷污染，其在環(huán)境中可存在數(shù)十年,。例如,，在 20 世紀(jì) 70 年代禁止了含砷農(nóng)用化學(xué)品的廣泛使用，但在一些土壤中,，砷suan鉛和砷suan 鈣的含量仍然很高,。土壤和水中的砷可被農(nóng)作物吸收。以葡萄酒為例,，砷 含量也會(huì)受到釀酒過程的影響,。 砷在食品和飲料中以多種形式存在，每種形式的毒性各不相同,。砷的無機(jī) 形式 (iAs) 包括 As(III)和 As(V),，這些形式的毒性 最高，被歸類為 1 類致癌物質(zhì),。相比之下,，砷甜菜堿 (AB) 是新鮮海鮮中含 量最高的 As 形式，對人體基本上無毒。由于不同形態(tài) As 毒性的極大差異以及 iAs 潛在的健康威脅,，因此很有必要測定食品中各 種形態(tài)砷的含量,，而不僅僅是總 As 濃度。美國食品藥 品監(jiān)督管理局 (FDA) 對蘋果汁中的 iAs 規(guī)定了 10 µg/kg (ppb) 的行動(dòng)限值[2] 含量的控制法規(guī),。加拿大（酒商質(zhì)量聯(lián)盟 ,，但美國目前尚未頒布葡萄酒中 As (VQA) 大略省）和歐洲（國際葡萄與葡萄酒組織 (OIV) ,，安 ）分別 將葡萄酒中總砷的最高可接受限值規(guī)定為 100 µg/L 和 200 µg/L (ppb)[3, 4],。
食品砷污染是公眾關(guān)注的焦點(diǎn)。因此,，非常需要快速可 靠的篩查方法來準(zhǔn)確測定食品和飲料中的 iAs 含量,，以 滿足現(xiàn)有和未來的法規(guī)要求。其中,，最有用且可靠的一 種方法是,，使用高效液相色譜 (HPLC) 對不同形態(tài)的砷 進(jìn)行分離，然后采用電感耦合等離子體質(zhì)譜 (ICP-MS) 進(jìn)行定量分析[5],。 本文所述的方法基于先前由 Jackson 開發(fā)的 As 形態(tài)分 析方法,，該方法將 HPLC 與串聯(lián)四極桿 ICP-MS (ICPMS/MS) 聯(lián)用[6]。本研究也采用 HPLC-ICP-MS/MS,。然 而,，與分別分析 iAs 形態(tài)不同，在分析之前先用過氧化 氫將 As(III) 氧化為 As(V)[7, 8],。本方法通過轉(zhuǎn)化 As(III) 并 以 As(V) 的形式分析所有無機(jī)形態(tài),，能夠在 2 分鐘內(nèi) 將一甲基胂酸 (MMA) 和二甲基胂酸 (DMA) 與 iAs（呈 As(V) 形態(tài)）分離。本方法的分析時(shí)間比當(dāng)前用于 As 形 態(tài)分析的 FDA 方法快 10 倍[9]
在本研究中,，在 ICP-MS/MS 碰撞/反應(yīng)池 (CRC) 中采用 氧氣作為反應(yīng)氣體,，以解決對 75As 的光譜干擾，同時(shí)保 持出色的靈敏度,。結(jié)果證明,，新方法具有出色的準(zhǔn)確性 和重現(xiàn)性。由兩個(gè)參與實(shí)驗(yàn)室分析同一種葡萄酒基質(zhì),， 對本方法進(jìn)行了進(jìn)一步驗(yàn)證
標(biāo)準(zhǔn)品 As (III) 和 As (V) 標(biāo)準(zhǔn)品購自 Spex Cer tiprep (Christiansburg, VA; Metuchen, NJ, USA),。MMA 和 DMA 標(biāo)準(zhǔn)品購自 Chem Service (West Chester, PA, USA)。AB 標(biāo)準(zhǔn)品同樣購自 Chem Service,，將其用作 流動(dòng)注射標(biāo)記物（內(nèi)標(biāo)）進(jìn)行柱后注射,。對于 DMA、 MMA 和總 iAs（As (III) 和 As (V) 總和）,，制備濃度為 0.1,、0.5、1.0、5.0,、10 和 20 µg/L (ppb) 的校準(zhǔn)標(biāo)樣,。
樣品 在驗(yàn)證 (V) 研究中使用五種不同的加利福尼亞葡萄酒。 每種葡萄酒分別代表五種主要形式的葡萄酒之一：紅葡 萄酒,、白葡萄酒,、玫瑰紅葡萄酒、起泡酒和餐后甜酒,。 在商品市場菜籃子 (MB) 亞葡萄酒進(jìn)行了分析,。表 研究中，對另外五種加利福尼 1 列出了所有樣品的葡萄酒 類型,、栽培品種、種植產(chǎn)地,、年份和酒精含量的詳細(xì) 信息,。
樣品前處理 以 1:1 的比例將 H2O2 加入所有樣品中，將 As(III) 氧化 為 As(V),。用去離子水進(jìn)一步稀釋每個(gè)樣品,，使總稀釋 倍數(shù)為 5 或 6（兩個(gè)稀釋倍數(shù)之間的結(jié)果沒有差異）。 然后使每個(gè)樣品通過 0.45 µm 針頭過濾器,，以除去所有 顆粒物,。所有 As 形態(tài)按以下三種濃度加標(biāo)至樣品 V-1、 V-4,、V-5（均為一式兩份）：5,、10、30 µg/kg,。
儀器 將配備 Hamilton PRP-X100 5 µm 50 × 2.1 mm 色譜 柱的 Agilent 1260 HPLC 與 ICP-MS (ICP-MS/MS) 聯(lián)用,。流動(dòng)相為 Agilent 8800 40 mmol/L 串聯(lián)四極桿 碳 酸銨（(NH4)2CO3，痕量金屬級 99.999%,，購自 Sigma Aldrich）,，其中含 3% v/v 甲醇（Optima LC/MS 購自 級， Fisher Chemical）,，并用氫氧化銨（Optima 級,， Fisher Scientific）將 pH 調(diào)節(jié)至 9.0。ICP-MS/MS 配備標(biāo)準(zhǔn)樣品引入系統(tǒng),，該系統(tǒng)包括帶內(nèi)徑 2.5 mm 中心管 的石英炬管,、石英霧化室、玻璃同心霧化器和鎳接口 錐,。按照 FDA EAM §4.10 器操作條件匯總于表 2 中,。
快速方法的開發(fā) 在本研究中，方法開發(fā)的重點(diǎn)在于縮短每個(gè)樣品的分析 時(shí)間。在本方法的開發(fā)過程中,，我們參照 Jackson 的 方法,，使用較小的進(jìn)樣量、短離子交換色譜柱,、氧氣池 氣體和高流動(dòng)相線速度[6],。 圖 1 示出了 0.5、1.0,、5.0 和 20 µg/kg 代表性校準(zhǔn)標(biāo) 樣組的重疊色譜圖,。所有 As 形態(tài)均在兩分鐘內(nèi)得到清 晰分離。只需將 As(III) 氧化為 As(V) 并以 As(V) 的形 式分析所有 iAs,，即可相對當(dāng)前的 FDA 法規(guī)方法顯著縮 短分析時(shí)間[9],。