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采用 5977B 單四極桿氣質(zhì)聯(lián) 用系統(tǒng)測(cè)定土壤中有機(jī)氯農(nóng)藥含量
閱讀：620 發(fā)布時(shí)間：2021-3-22摘要 ：本文采用 Agilent 7890B 氣相色譜/5977B 單四極桿氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)測(cè)定土壤樣品中的 有機(jī)氯農(nóng)藥含量。文中所述樣品前處理方法以及儀器分析方法*參考國(guó)家環(huán)境 保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)《土壤和沉積物 有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（報(bào)批稿）以及 《土壤和沉積物 有機(jī)物的提取 加壓流體萃取法》(HJ783-2016),。采用加壓快速溶 劑萃取提取法并結(jié)合弗羅里硅土凈化法,，對(duì)土壤樣品進(jìn)行樣品前處理。該方法成 功應(yīng)用于土壤中 26 種有機(jī)氯農(nóng)藥（含替代物）的分析測(cè)定,，樣品加標(biāo)回收率,、 儀器低檢測(cè)限分別達(dá)到 73%-116%,、0.07-0.39 μg/kg，均滿(mǎn)足《土壤和沉積物 有 機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（報(bào)批稿）規(guī)定的 40-150%,、0.08-0.36 mg/kg 的 要求。
前言 為切實(shí)加強(qiáng)土壤污染防治,，逐步改善土壤環(huán)境質(zhì)量,，2016 年 5 月 31 日，《土壤 污染防治行動(dòng)計(jì)劃》（簡(jiǎn)稱(chēng)“土十條”）正式由國(guó)務(wù)院印發(fā)實(shí)施,，并展開(kāi)了一系 列土壤污染現(xiàn)狀調(diào)查,。此次詳查對(duì)檢測(cè)項(xiàng)目、分析方法和參考標(biāo)準(zhǔn)做了明確的規(guī) 定：共包括土壤,、地下水和農(nóng)產(chǎn)品（小麥/水稻）3 個(gè)檢測(cè)領(lǐng)域,，其中土壤污染物 包括無(wú)機(jī)污染物（氟化物、氰hua物和 15 種重金屬）,、有機(jī)污染物（10 種）和理化 性質(zhì)（5 項(xiàng)）,；地下水污染物包括無(wú)機(jī)污染物和有機(jī)污染物（項(xiàng)目同土壤）。其中 土壤中有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定采用《土壤和沉積物 有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜 法》（報(bào)批稿）方法,。 為了配合國(guó)家關(guān)于“土十條”中有機(jī)氯農(nóng)藥檢測(cè)的實(shí)施,，安捷倫推出了針對(duì)《土 壤和沉積物 有機(jī)氯農(nóng)藥的測(cè)定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（報(bào)批稿）的完整解決方案，供 廣大的安捷倫用戶(hù)作為日常檢測(cè)的參照,。
實(shí)驗(yàn)部分 試劑和樣品 正己烷,，色譜純級(jí)，購(gòu)于百靈威,；丙酮,，色譜純級(jí)，購(gòu)于 百靈威,；分別配制正己烷-丙酮混合溶劑（1:1,，V/V）和正 己烷-丙酮混合溶劑（9:1，V/V）,。硅藻土,，優(yōu)級(jí)純級(jí)，購(gòu) 于安捷倫,，在馬弗爐中 450 °C 烘烤 4 小時(shí)后冷卻,，置于干 燥器內(nèi)玻璃瓶中備用。有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)品,，購(gòu)于安捷倫,，用正 己烷配制得到 10.0 mg/L 的有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)溶液；內(nèi)標(biāo)物（菲D10,，?-D12）,，購(gòu)于百靈威,，用正己烷配制得到 10.0 mg/L 的 內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液；替代物（對(duì)三聯(lián)苯-D14）,，購(gòu)于百靈威,，用 正己烷配制得到 10.0 mg/L 的替代物標(biāo)準(zhǔn)溶液。 儀器和設(shè)備 儀器： Agilent 7890B 氣相色譜/5977B 單四極桿氣質(zhì)聯(lián) 用系統(tǒng),，配備 EI 源 提取裝置：快速溶劑萃取儀 (HPSE) 濃縮裝置： 氮吹濃縮儀 固相萃取裝置,，弗羅里硅土固相萃取凈化小柱（1000 mg， 6 mL） 其它： 移液槍
樣品前處理 采集與保存 土壤樣品按照 HJ/T 166 的相關(guān)要求采集和保存,，沉積物樣 品按照 GB 17378.3 的相關(guān)要求采集和保存,。 試樣制備 去除樣品中的異物，稱(chēng)取約 5 g（ 0.01 g）樣品雙 份,。土壤樣品一份按照 HJ613 測(cè)定干物質(zhì)含量,，另一份加 入 3 g 硅藻土，研磨均化成流砂狀,。沉積物樣品一份按照 GB17378.5 測(cè)定含水量,，另一份按照土壤樣品脫水，然后加 入 3 g 硅藻土,，研磨均化成流砂狀,。如水分含量較高，可 以采用凍干法進(jìn)行脫水,。
樣品提取 — 加壓流體萃取 將研磨好的試樣全部裝入 11 mL HPSE 提取管中 ,。如需樣 品加標(biāo)，應(yīng)向萃取管中加入 50 μL 10 μg/mL 有機(jī)氯農(nóng)藥混 合標(biāo)準(zhǔn)溶液和 50 μL 10 μg/mL 替代物標(biāo)準(zhǔn)溶液,。之后將提 取管壓實(shí)后旋緊蓋好,，放入 HPSE 提取設(shè)備中。以正己烷丙酮混合溶劑（1:1,，V/V）為提取溶劑,，按以下條件進(jìn)行 萃取：萃取溫度 100 °C,，萃取壓力 1500 psi,，靜態(tài)萃取時(shí)間 5 min，淋洗為 60% 池體積,，氮?dú)獯祾邥r(shí)間 60 s,，萃取循環(huán) 次數(shù) 2 次。收集提取溶液,。 樣品濃縮和更換溶劑 收集萃取溶液后采用氮吹濃縮法將溶液吹至近干,，用 1 mL 正己烷將其復(fù)溶后以備凈化。氮吹過(guò)程中加熱溫度設(shè)定值 不得超過(guò) 40 °C，好保持在 30 °C 左右,。同時(shí)氮吹過(guò)程中 要保證氮?dú)饬魉龠m中,，始終使氣流在液面上形成旋渦，不 可過(guò)大溢出,，也不要過(guò)小以免氮吹時(shí)間過(guò)長(zhǎng),。吹至近干的 狀態(tài)是指仍保留一小滴液體，不能*吹干,，這點(diǎn)對(duì)于回 收率影響很大,。
樣品凈化 SPE 小柱活化：用 10 mL 正己烷活化弗羅里硅土凈化小柱， 流速為液滴自然淋洗速度,； 上樣：將置換好溶劑的樣品轉(zhuǎn)移到活化好的凈化柱上，之 后將淋洗速度調(diào)為 0,，靜置 2 min,，使樣品與吸附材料充分 接觸后，打開(kāi)流速控制器,，進(jìn)行自然淋洗,； 淋洗：使用 10 mL 正己烷-丙酮混合溶劑（9:1，V:V）作為淋 洗液進(jìn)行淋洗,，采用自然淋洗速度,，收集所有淋洗液； 濃縮定容：氮吹吹至近干,，用 0.5 mL 正己烷復(fù)溶,，加入 10 μL 10 μg/mL 內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液后定容至 1 mL，以備 GC/MS 分析,。 在樣品凈化過(guò)程中需注意：流速需保持自然淋洗速度,，請(qǐng) 勿加快淋洗速度；上樣后將流速調(diào)為 0,，使樣品與吸附材 料充分接觸,，保持 1-2 min，之后再打開(kāi)閥門(mén)進(jìn)行淋洗,；選 擇合適極性的淋洗溶劑,，使目標(biāo)物能夠被充分洗脫，同時(shí) 優(yōu)化淋洗體積,，這兩點(diǎn)對(duì)于獲得合規(guī)的回收率非常重要,。
儀器分析條件 氣相色譜條件 氣相色譜： Agilent 7890B 氣相色譜系統(tǒng) 色譜柱： Agilent DB-5MS UI 毛細(xì)管柱 30 m × 0.25 mm × 0.25 μm 柱溫箱： 初始溫度 80 °C，保持 2 min,，以 25 °C/min 升至 180 °C,，再以 5 °C/min 升至 300 °C， 保持 2 min 載氣： 氦氣,，恒流模式,，1.0 mL/min 進(jìn)樣口溫度： 270 °C,，不分流進(jìn)樣 進(jìn)樣量： 1.0 μL 質(zhì)譜條件 質(zhì)譜： Agilent 5977B 單四極桿氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng) 離子源： 電子轟擊源，70 eV 離子源溫度： 280 °C 四極桿溫度： 180 °C 傳輸線(xiàn)溫度： 280 °C 溶劑延遲時(shí)間： 3.0 min EM 電壓： 增益因子 1 檢測(cè)模式： SIM+Scan（化合物保留時(shí)間,，定量和定性 離子見(jiàn)表 1）
結(jié)果與討論:
參考土壤中有機(jī)氯農(nóng)藥測(cè)定報(bào)批稿中的色譜柱升溫程序并進(jìn) 行優(yōu)化,，如圖 1 所示，20 μg/L 標(biāo)準(zhǔn)溶液中 26 種有機(jī)氯農(nóng)藥 （含替代物）和 2 種內(nèi)標(biāo)物均能夠得到充分的分離,，可以分 別進(jìn)行定量,。 基質(zhì)干擾對(duì)分析的影響 根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，土壤基質(zhì)對(duì)有機(jī)氯類(lèi)化合物具有較大 的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng),，26 種有機(jī)氯農(nóng)藥（含替代物）的響應(yīng)強(qiáng) 度都有較大增加,；但是，內(nèi)標(biāo)物的碎片離子響應(yīng)卻并沒(méi)有 受到基質(zhì)的影響,，響應(yīng)強(qiáng)度比較穩(wěn)定,，充分說(shuō)明了土壤基 質(zhì)對(duì)內(nèi)標(biāo)菲-D10 沒(méi)有明顯的基質(zhì)效應(yīng)，如圖 2 所示,。因此,， 通過(guò)實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定本次實(shí)驗(yàn)需要使用帶基質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)來(lái) 進(jìn)行定量分析和樣品添加回收率的計(jì)算。
儀器檢測(cè)限 儀器檢測(cè)限 (IDL) 是指儀器在可信度的條件下能檢測(cè)到 分析物的低信號(hào)或低含量,。雖然信噪比 (SNR) 對(duì)于大 多數(shù)基質(zhì)噪音干擾明顯的 GC/MS 應(yīng)用仍具有一定的價(jià)值,， 但 IDL 是一個(gè)更好的性能測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)，基于統(tǒng)計(jì)學(xué)的原理,， IDL 消除了低噪音 SNR 帶來(lái)的不確定性,。DL 與重復(fù)進(jìn)樣所測(cè)得的峰面積響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)偏差 STD 以及 置信因子 tα 有關(guān)。計(jì)算得到相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD = STD/平 均值）的情況下,，IDL 可以用進(jìn)樣的標(biāo)樣量的單位（ng,、pg 或 fg）表示，如使用置信水平為 99% (1-α=0.99) 的 Student-t 檢驗(yàn)來(lái)統(tǒng)計(jì) 8 次連續(xù)進(jìn)樣的 RSD%,，IDL 的計(jì)算公式為： IDL = (tα) (RSD%)（標(biāo)樣量） 本實(shí)驗(yàn)采用 2 ng/mL 基質(zhì)配標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液作為 IDL 測(cè)試溶液,， 計(jì)算 8 次重復(fù)進(jìn)樣（自由度 n = 7）的 RSD%，并在置信 水平 99% 的條件下從 t-表查得 tα = 2.998,，因此,，а-六六六 IDL = (2.998) × (3.8%) × (2 pg) = 0.23 pg，其他 25 個(gè)化合物的 IDL 計(jì)算方法與此一致,，