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模擬 Agilent 1200 系列四元液相色譜儀分析抗組胺
閱讀：633 發(fā)布時(shí)間：2020-12-30摘要：安捷倫的智能系統(tǒng)模擬技術(shù) (ISET) 可實(shí)現(xiàn)常規(guī)液相色譜系統(tǒng)分析方法的無(wú)縫轉(zhuǎn)移，例如 Agilent 1200 系列四元液相色譜儀到 Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色譜儀。本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)展示了 ISET 在分析五種抗組胺藥物方面的優(yōu)勢(shì),。對(duì)不同實(shí)驗(yàn)的保留時(shí)間與分離度進(jìn)行評(píng)估,，并與采用 1200 系列四元液相色譜儀獲得的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。通過(guò)啟用 ISET,，兩種系統(tǒng)獲得了良好的一致性,。
前言從常規(guī) HPLC 系統(tǒng)到 Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色譜儀等 UHPLC 系統(tǒng)的分析方法轉(zhuǎn)移，對(duì)各種實(shí)驗(yàn)室都是重要而且通常很關(guān)鍵的問(wèn)題,，對(duì)處于嚴(yán)格監(jiān)管環(huán)境下的實(shí)驗(yàn)室更是如此,。UHPLC 系統(tǒng)與常規(guī) HPLC 系統(tǒng)相比具有更低的系統(tǒng)延遲體積，并且通常會(huì)表現(xiàn)出不同的泵混合行為,。這些特性可能會(huì)導(dǎo)致儀器間的方法轉(zhuǎn)移產(chǎn)生不同的保留時(shí)間 (RT) 和分離度,。為避免對(duì)傳統(tǒng)分析方法進(jìn)行費(fèi)時(shí)又昂貴的重新驗(yàn)證，可以在開(kāi)始運(yùn)行時(shí)配置等度保持或部署安裝額外延遲體積1 ,。而采用本方法時(shí)僅需要考慮延遲體積,，而不用擔(dān)心兩種分析泵混合行為的差異。安捷倫的智能系統(tǒng)模擬技術(shù) (ISET) 可實(shí)現(xiàn)無(wú)縫的方法轉(zhuǎn)移,，并能夠獲得相似的色譜結(jié)果2 ,。通過(guò)啟用 ISET，無(wú)需改變分析方法或修改液相色譜系統(tǒng)就可以補(bǔ)償延遲體積和泵混合行為的差異,。本應(yīng)用簡(jiǎn)報(bào)介紹了五種抗組胺藥物混合物的分離方法,。首先將該藥物混合物在 Agilent 1200 系列四元液相色譜儀上進(jìn)行分析。然后將分析方法轉(zhuǎn)移至 Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色譜儀,，并分別選擇啟用與不啟用 ISET 功能進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。在額外實(shí)驗(yàn)中使用 ISET 的微調(diào)選項(xiàng)來(lái)展示如何對(duì)分析方法轉(zhuǎn)移進(jìn)一步優(yōu)化。對(duì)保留時(shí)間與分離度進(jìn)行評(píng)估,，并與采用 1200 系列四元液相色譜儀的結(jié)果進(jìn)行比較,。
實(shí)驗(yàn)部分儀器采用以下儀器對(duì)抗組胺藥物進(jìn)行分析。 Agilent 1200 系列四元液相色譜儀： • Agilent 1200 系列四元泵 (G1311A) • Agilent 1200 系列自動(dòng)進(jìn)樣器 (G1329A) • Agilent 1200 系列柱溫箱 (G1316A) • Agilent 1200 系列二極管陣列檢測(cè)器 (G1315D) Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色譜儀： • Agilent 1260 Infinity II 全能泵 (G7104C) • Agilent 1260 Infinity II Multisampler (G7167A),，配備集成式樣品冷卻裝置（選件 #100） • Agilent 1260 Infinity II 高容量柱溫箱 (G7116A) • Agilent 1260 II 二極管陣列檢測(cè)器 (G7117C)
軟件 Agilent OpenLAB CDS 2.2 (M8413A) 樣品五種抗組胺藥物混合物,，每種濃度為 150 ng/µL（按洗脫順序排列）：曲吡那敏、氯苯那敏,、丁卡因,、異丙嗪和西替利嗪?；瘜W(xué)品所有試劑均為液相色譜級(jí),。新制超純水產(chǎn)自配置 0.22 µm 膜式終端過(guò)濾器 (Millipak) 的 Milli-Q Integral 水純化系統(tǒng)。所有抗組胺藥物均購(gòu)自 Sigma-Aldrich 公司 (St. Louis, USA),。
結(jié)果與討論采用常規(guī)分析方法在 1200 系列四元液相色譜儀上使用填充 3.5 µm 填料的 4.6 × 75 mm 色譜柱對(duì)五種抗組胺藥物進(jìn)行分析,。首先,，在不啟用 ISET 的狀態(tài)下將分析方法轉(zhuǎn)移至 1260 Infinity II Prime 液相色譜儀。與預(yù)期結(jié)果相同,，所有五種分析物保留時(shí)間均明顯提前,。接下來(lái)，啟用 ISET 功能,。圖 1 所示為疊加色譜圖,，包括使用 1200 系列四元液相色譜儀的原始色譜圖以及啟用和不啟用 ISET 時(shí)采用 1260 Infinity II Prime 液相色譜儀測(cè)得的兩幅色譜圖。使用 ISET 時(shí),，抗組胺藥物的 RT 能夠與原始色譜圖保持一致,，并顯示 RT 偏差小于 3%，很好地滿足了 ISET 指標(biāo) 5%2 的要求,。相比之下,，不使用 ISET 時(shí)，RT 偏移在 5% 至約 11% 之間,。為進(jìn)一步優(yōu)化保留時(shí)間的一致性,，需要激活 ISET 的微調(diào)功能。延遲體積偏移為 –50 µL 時(shí),，所有峰的保留時(shí)間略微提前,。圖 2 所示為疊加色譜圖，包括原始色譜圖以及 ISET 激活與未激活微調(diào)功能時(shí)采用 1260 Infinity II Prime 液相色譜儀獲得的兩幅色譜圖,。由于配置了微調(diào)功能,，五種抗組胺藥物的 RT 與原始色譜圖一致，并顯示保留時(shí)間偏移的偏差小于 0.5%,。表 2 所示為進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的保留時(shí)間數(shù)據(jù)概覽,。
